grEST1和grEST2的纯化及性质研究

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grEST1和grEST2是在胡萝卜愈伤组织中发现的两个活性受重力变化影响的酯酶.经聚丙烯酰胺电泳与酯酶染色,发现在胡萝卜小苗和胡萝卜根中均存在这两种酯酶.三周回转实验证明胡萝卜小苗中grEST1和grEST2的活性也受重力变的影响.以胡萝卜根为原料纯化grEST1和grEST2,经硫酸铵分级沉淀(30﹪-60﹪)、DEAE-sephrose离子交换柱层析、Phenyl-superose疏水柱层析、Monm-Q离子交换柱层析后获得两酶纯化的样品.对纯化后样品进行最适pH实验,发现grEST1和grEST2的最适pH均为7.8.经氮末端氨基酸序列测定得知,grEST1的氮末端序列为MVNDANFRIG,grEST2的氮末嵯序列为ATLGKFRVLV.依据两酯酶的氮末嵯序列设计简并引物,进行单侧PCR,所获实验结果初步证明受模拟微重力刺激后,grEST1和grEST2的表达量发生了变化.
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