血小板浓度和血小板聚集率的关系

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随着我国经济的发展,人们物质生活水平的提高,冠心病等血栓栓塞性疾病的发病率越来越高,严重威胁着人民群众的健康。冠状动脉内不稳定斑块即易损斑块(vulnerable plaque)纤维帽破裂,激活血小板,引起血小板的粘附、释放、聚集,从而形成白色血栓,继续发展形成红色血栓,从而引起冠状动脉严重狭窄或阻塞,在临床上导致不稳定心绞痛或急性心肌梗死的发生。血小板不仅在血栓的形成中起着关键的作用,对冠心病的发生、发展及预后均有非常重要的作用。血小板的体积、计数都是影响冠心病预后的独立因素。研究发现,即使在表面正常的中年男性中,血小板聚集率升高者,冠心病的发病率亦增加。血小板聚集功能是血小板的重要生理特性之的表现,因此评价血小板聚集功能对判断血栓前状态,对冠心病的预防和治疗监测以及预后有着重要意义。检测血小板功能的方法有很多种,但是测定血小板聚集率仍然是较推崇的金方法。虽然血小板聚集受多种因素的影响,如血小板浓度,体积,分布宽度等因素的影响,但是血小板聚集率的测定是一种功能性测定,是血小板激活,释放以及膜糖蛋白受体等综合因素的共同表现,能够很好地反映血小板的活化状态。各种因素对血小板功能的影响可以表现为血小板聚集率的改变。测定血小板聚集率常用的有比浊法和电阻抗法。比浊法,由于需要通过两次离心,以获取富血小板血浆(Platelet-rich Plasma,PRP)和乏血小板血浆(Platelet-poor Plasma,PPP),所以容易丢失体积较大的血小板并因两次离心使血小板的某些调节物(如前列腺素、环磷酸腺苷)分解导致血小板聚集率的变异,且受到高脂血症和溶血的影响。目的:血小板浓度是血小板聚集率的重要影响因素之一。目前关于血小板聚集功能的研究多通过血小板计数的均值来排除血小板浓度对聚集率的影响,或将标本滴定到特定的血小板浓度以排除血小板计数对聚集率的影响。国内外许多研究将PRP浓度调整到200×109/L,以更好的测定血小板的聚集率。血小板浓度和聚集率之间到底有着什么样的关系,尚不明确。有研究表明当血小板浓度在200-600×109/L之间时,用比浊法测得血小板聚集率不受血小板计数的影响。亦有研究表明血小板计数与聚集率相关。本实验选用全血阻抗法,研究正常人群血小板浓度和血小板聚集率的关系。方法:以机采血小板为研究对象,将其稀释成不同的浓度,采用不同的诱导剂,从而模拟不同的因素导致的血小板聚集,测定不同浓度血小板的聚集率。血小板来自严格符合国家献血者健康检查标准的无偿献血者。机采血小板浓度约在1280×109/L左右,共计30份,将其稀释成4个浓度组,C1组: 50×109/L; C2组: 150×109/L; C3组: 300×109/L; C4组: 600×109/L。分别用二磷酸腺苷(Adenosine diphosphate,ADP)终浓度10umol/L(ADP10组)和终浓度20umol/L(ADP20组)、花生四烯酸(Arachidonic acid, AA)终浓度0.5mmol/L(AA组)、肾上腺素(Adrenaline, ADR)终浓度10ug/ml(ADR组)作为诱导剂,采用美国Chrono-Log公司生产的全血阻抗法血小板聚集仪(Model 590)测定不同诱导剂诱导的不同浓度的血小板的聚集率(Platelet aggregation, PAg),记录其最大聚集率及聚集曲线。计量资料采用均数±标准差(x±s)表示,各组比较不同弄浓度的血小板聚集率的差异采用单因素方差分析,若有差异,进行组内比较,组内的比较采用Dunnet’s T3检验。以上所述统计学处理均应用SPSS 17.0统计软件进行统计学处理,P<0.05认为有统计学差异。结果:四种诱导剂作用下的不同浓度的血小板聚集率均有统计学差异。在任一诱导剂的诱导下,血小板的聚集率随着浓度的增加而增加,但是不成线性关系,随着浓度的增加,递增的幅度逐渐降低。在浓度为300×109/L和600×109/L时尤为明显。对四种诱导剂诱导的不同浓度的聚集率分别进行曲线拟合,选用拟合二次方程、拟合对数方程、拟合三次方程、拟合S型曲线等四个曲线模型进行拟合,其中对数关系Y=b0+b1㏑ X在四组图中均得到了很好的拟合。推测在正常人群聚集率和浓度之间存在对数关系。结论:正常人群血小板聚集率与血小板浓度相关,随着血小板浓度的升高,聚集率增大,但是随着血小板浓度的增加,血小板聚集率的增幅递减。血小板浓度和聚集率之间成对数关系。
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