甘草渣中总黄酮的提取及甘草渣的综合利用

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甘草中的主要有效成分为皂苷类和黄酮类,而以往人们仅对甘草中皂苷类成分作了大量深入的研究,评价甘草的质量也仅以甘草酸的含量作为其质量优劣的标准,显然不够全面。同时,随着药理学的深入研究,表明甘草黄酮类成分是甘草的一类主要活性成分,具有抗炎、抗HIV、抗肿瘤等多种药理作用和广阔的开发及应用前景,已成为当前中药甘草研究的热点。本文以提取过甘草酸的废渣作为原料,采用了不同的方法提取了其中残留的大量甘草总黄酮,结合05年版药典对甘草中黄酮类成分进行研究及其含量测定,为建立甘草黄酮类成分的质量标准提供理论依据.   全文由四部分组成:   第一章通过大量的文献,对国内外中药研究的现状、发展趋势、新型的有效成分提取分离技术及中药甘草的研究现状(包括化学成分、药理作用及其开发应用)以及甘草黄酮的提取技术进行了归纳和总结。在此基础上,归纳了本论文研究课题的立题依据、研究目的、意义及主要内容。   第二章分别采用不同的提取方法提取甘草渣中的黄酮,并进行了含量测定,发现复合酶法提取提取条件温和,有利于甘草黄酮母核活性的保护,提取率较其他提取方法高,确定了最佳提取工艺:固液比1∶20;每克甘草渣用50u/g纤维素酶0.8 ml、120u/g果胶酶30mg的条件下,乙醇浓度95%;温度50℃;酶解时间3h;PH=4.5。   第三章考虑到用复合酶提取用酶的成本问题,本章节结合甘草渣自身的功能特性,利用黑曲霉对甘草渣进行固体发酵产酶,一方面利用其自身产酶酶解细胞的纤维结构,促使有效成分溶出;另一方面,考虑到发酵后的甘草渣有一定的酶活性,且甘草又是一种营养成分很高的中草药,可以考虑将其应用到动物饲料添加剂中。鉴于这两个目的,本实验对发酵工艺进行了探索研究,确定了最佳的发酵工艺为:甘草渣:麸皮=6∶4,硫酸铵2%,磷酸二氢钾0.1%,硫酸镁0.1%,过磷酸钙0.5%,发酵时间3d,接种量6%,1.2倍的加水量。   第四章本章节对提取的甘草总黄酮进行了纯化研究,为规模化生产高浓度的甘草黄酮提供理论依据,分别采用了AB-8大孔树脂和超滤膜法纯化技术,通过上柱前后IR图谱对比发现,纯化后的产品纯度有很大的提高,并以上柱前后甘草黄酮含量的变化为基准,所得产品纯度提高了39.97%;在对超滤膜法纯化甘草黄酮的研究中,以膜通量为超滤效率的优劣评价指标,讨论了不同影响因素下膜通量的大小,确定了最优的纯化工艺:操作压力为0.6Mp,操作温度25~30℃,操作时间30min,提取液浓度在原浓度的基础上稀释3倍。以膜过滤前后甘草黄酮含量变化为基准,测得纯度提高了25.02%。
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