目的:通过检测肝细胞癌及癌旁组织、非癌肝组织中抑癌基因P14^ARF启动子甲基化状态以及其蛋白表达和P53蛋白表达情况,探讨它们与肝癌临床病理特征的关联,并分析P14^ARF基因甲基化与其蛋白表达和P53蛋白表达的相关性,探讨在肝癌发生发展过程中P14^ARF基因可能的作用机制。方法:通过甲基化特异性PCR（MSP）方法检测50例肝细胞癌组织、癌旁组织和18例非癌肝组织中P14^ARF基因启动子甲基化状态,并用免疫组织化学（IHC）法分别检测这50例肝细胞性肝癌组织、癌旁组织和18例非癌肝组织中P14^ARF以及P53蛋白的表达情况。结果:癌组织及癌旁组织中P14^ARF基因启动子甲基化阳性率分别为28.0%（14/50）和4.0%（2/50）,两者阳性率比较差异显著（P＜0.05）,非癌肝组织中未见阳性表达。P14^ARF蛋白在癌组织（66.0%,33/50）和癌旁组织（94.0%,47/50）中表达亦有显著性差异（P＜0.05）;在癌旁及非癌肝组织（100%,18/18）中的表达无明显差别（P＞0.05）。P53蛋白在癌及癌旁组织的表达阳性率分别为54.0%（27/50）,14.0%（7/50）,两组间差异有统计学意义（P＜0.05）;癌旁及非癌肝组织（11.11%,2/18）组织中的表达无明显差别（P＞0.05）。P14^ARF基因启动子甲基化和蛋白表达与临床分期、门脉癌栓、术后复发、肝外转移、肿瘤大小、肿瘤个数及血清AFP值无关（P＞0.05）,而在肿瘤分化程度高低上P14^ARF蛋白表达阳性率有显著性差异（P＜0.05）,P14^ARF基因启动子甲基化则无差异（P＞0.05）。P14^ARF基因启动子甲基化与蛋白表达呈负相关（γ=-0.493,P=0.001）。P53蛋白表达在有无门脉癌栓、术后复发、肝外转移、肿瘤分化程度高低分组间比较有显著性差异（P＜0.05）,在临床分期、肿瘤大小、肿瘤个数及血清AFP值等分组间没有显著性差异（P＞0.05）。P14^ARF基因启动子甲基化和P53蛋白表达在肝癌组织中呈显著正相关（γ=0.307,P=0.030）,P14^ARF和P53蛋白表达在肝癌组织中表达呈显著负相关（γ=-0.324,P=0.022）。结论:启动子区甲基化是P14^ARF基因失活的重要机制。P14^ARF启动子区异常甲基化可能参与了肝癌的发生发展,P14^ARF蛋白失活与突变型P53蛋白的高表达在肝细胞癌的发生及进展中起着重要作用。