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目的:通过检测肝细胞癌及癌旁组织、非癌肝组织中抑癌基因P14ARF启动子甲基化状态以及其蛋白表达和P53蛋白表达情况,探讨它们与肝癌临床病理特征的关联,并分析P14ARF基因甲基化与其蛋白表达和P53蛋白表达的相关性,探讨在肝癌发生发展过程中P14ARF基因可能的作用机制。方法:通过甲基化特异性PCR(MSP)方法检测50例肝细胞癌组织、癌旁组织和18例非癌肝组织中P14ARF基因启动子甲基化状态,并用免疫组织化学(IHC)法分别检测这50例肝细胞性肝癌组织、癌旁组织和18例非癌肝组织中P14ARF以及P53蛋白的表达情况。结果:癌组织及癌旁组织中P14ARF基因启动子甲基化阳性率分别为28.0%(14/50)和4.0%(2/50),两者阳性率比较差异显著(P<0.05),非癌肝组织中未见阳性表达。P14ARF蛋白在癌组织(66.0%,33/50)和癌旁组织(94.0%,47/50)中表达亦有显著性差异(P<0.05);在癌旁及非癌肝组织(100%,18/18)中的表达无明显差别(P>0.05)。P53蛋白在癌及癌旁组织的表达阳性率分别为54.0%(27/50),14.0%(7/50),两组间差异有统计学意义(P<0.05);癌旁及非癌肝组织(11.11%,2/18)组织中的表达无明显差别(P>0.05)。P14ARF基因启动子甲基化和蛋白表达与临床分期、门脉癌栓、术后复发、肝外转移、肿瘤大小、肿瘤个数及血清AFP值无关(P>0.05),而在肿瘤分化程度高低上P14ARF蛋白表达阳性率有显著性差异(P<0.05),P14ARF基因启动子甲基化则无差异(P>0.05)。P14ARF基因启动子甲基化与蛋白表达呈负相关(γ=-0.493,P=0.001)。P53蛋白表达在有无门脉癌栓、术后复发、肝外转移、肿瘤分化程度高低分组间比较有显著性差异(P<0.05),在临床分期、肿瘤大小、肿瘤个数及血清AFP值等分组间没有显著性差异(P>0.05)。P14ARF基因启动子甲基化和P53蛋白表达在肝癌组织中呈显著正相关(γ=0.307,P=0.030),P14ARF和P53蛋白表达在肝癌组织中表达呈显著负相关(γ=-0.324,P=0.022)。结论:启动子区甲基化是P14ARF基因失活的重要机制。P14ARF启动子区异常甲基化可能参与了肝癌的发生发展,P14ARF蛋白失活与突变型P53蛋白的高表达在肝细胞癌的发生及进展中起着重要作用。