蓝莓是在近些年发展起来的一种高价值的新兴果树,自20世纪80年代引入中国以来,从小面积种植到大规模商业化栽培,从小范围局部区域已扩大到全国10多个省份。随着蓝莓种植面积、市场的扩大、需求量的不断增加,各种病虫害的植保问题随之而来,受至植保工作者的关注。本研究室主要致力于蓝莓等小浆果新病害的鉴定及其主要病害的研究。在2014年病害调查中,发现一种新的蓝莓叶枯病,发病症状易与灰霉病混淆,课题组将其列为了重点鉴定对象。同时由于灰霉病在生产中引起较大为害,是蓝莓栽培中的主要病害之一,课题组于2012-2015年持续采集分离灰霉病菌,开展蓝莓与常见果蔬灰霉病菌的比对研究,主要在种群鉴定、ISSR指纹图谱、图谱类型与致病力及抗药性关联程度等几个方面开展研究。工作进展如下：1.在江西蓝莓产区发现一种新的叶枯病,易与灰霉病混淆,初期从叶缘或叶尖开始侵染,病斑不规则,后期干枯呈卷曲状。严重影响植株长势,造成较大经济损失。经过致病性检测确认致病菌后,进而对其开展了形态学及ITS与TEF-1a序列分析,鉴定为亚细亚镰孢菌(Fusarium aisiaticum,简称FA),是为害蓝莓的新纪录种。2.分别从蓝莓、番茄、黄瓜、茄子等寄主上分离获得灰霉病菌共273株。通过PDA培养性状及形态差异共筛选出35株代表菌株用于后续研究。在形态学初步鉴定基础上采用ITS和BC729序列进行首次种群验证；进而采用G3PDH、HSP60和RPB2等三基因联合系统发育分析进行再次种群鉴定。结果表明35株代表菌均属于灰葡萄孢种群Botrytis cinerea。3.虽然筛选出的35株代表菌均同一种群,但其PDA菌落在孢子产生、菌核特性等方面存在明显差异,继而对其进行了遗传图谱差异研究。灰葡萄孢作为代表菌株B.cinerea进行ISSR指纹图谱的构建。依据稳定重复、主带明显、带间距宽的筛选标准,共获得3条可用于ISSR遗传图谱构建的引物,分别为807、864和886。35株代表菌经引物807扩增后出现3种(a、b、c)不同类型指纹图谱,经引物864扩增后出现4种(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)不同类型图谱,经引物886扩增后出现5种(A、B、C、D、E)不同类型图谱。将以上3个引物的扩增图谱综合分析,35株代表菌共获得9个类型图谱(N1、N2、N3、C1、C2、C3、C4、C5、S1)。随机从代表菌株之外的其他菌株中选取32株菌进行图谱验证。结果表明32株验证菌分别隶属于N1、C2、C3、C4、C5、S1等图谱类型,未出现新类型图谱。4.灰霉菌ISSR图谱类群与致病性及抗药性关联试验分析表明它们之间不存在明显的关联性。将做完ISSR图谱分析的67株菌的致病力进行测定,研究结果为C1图谱类型中强、弱致病菌各占50%；C2图谱类型中强致病力、弱致病力、无致病力菌株分别占23.3%,中致病力菌株占30.1%；C4类型中2级、1级、0级致病力菌株各占15%,3级致病力菌株占65%；同样地,其他图谱类型也出现类似情况,即各图谱类型下不同致病力等级的菌株均有分布,存在致病力分化现象。经过比较,筛选出4种杀菌剂对灰霉菌株进行抗药性测定：多菌灵、腐霉利,嘧霉胺,咯菌腈。采用MIC法(最低抑制浓度法)作为抗药性初步鉴定的方法,对35株不同类型代表菌株进行了初步的抗药性鉴定,结果是35株灰葡萄孢菌中共得到了腐霉利抗性菌株21株,多菌灵抗性菌株34株,嘧霉胺抗性菌株26株,咯菌腈抗性菌株只有1株。其中在腐霉利的抗性初筛试验结果中,类型C2、类型N3全部菌株均为抗性菌株,N1、N2与S1菌群各只有一株代表菌株,均表现敏感；35株菌中只有一株属于C2群的菌株出现抗药性,其余34株均表现为敏感；对多菌灵的抗性试验中,除C1菌群中出现一株抗性菌株外,其他菌群代表菌株全部表现为抗性