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研究背景和目的:前列腺癌是老年男性泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤之一,其发病率呈明显的增长趋势,且前列腺癌极易发生转移,从而引发一系列并发症,导致患者死亡。因此,探索和开发治疗前列腺癌的新药物显得尤为迫切。在前期研究中,我们发现荔枝核总黄酮可明显抑制前列腺癌细胞的生长和转移,但深入的分子机制尚不明确。本论文选用不同类型的前列腺癌细胞,采用多种现代分子生物学研究手段,围绕细胞周期调控、凋亡、转移等方面,探索荔枝核总黄酮抑制前列腺癌细胞生长和转移的分子机制。研究方法:利用MTS实验检测了荔枝核总黄酮对前列腺癌细胞增殖的影响;利用细胞平板克隆实验检测了荔枝核总黄酮对前列腺癌PC3和DU145细胞体外克隆形成能力的影响;利用流式细胞检测技术,分别检测了荔枝核总黄酮对前列腺癌PC3和DU145细胞周期和凋亡的影响;分别采用细胞划痕实验和Transwell实验检测荔枝核总黄酮对前列腺癌PC3和DU145细胞迁移和侵袭能力的影响;通过观察前列腺癌细胞形态的变化,探索了荔枝核总黄酮对前列腺癌细胞上皮-间质样转化(EMT)的影响,并通过Western-Blot检测了荔枝核总黄酮对前列腺癌细胞中EMT相关蛋白标记物的影响;为了深入探索荔枝核总黄酮抗前列腺癌的分子机制,我们通过Western-Blot技术对荔枝核总黄酮可能调控的信号通路上的关键蛋白的表达情况进行了检测;研究结果:MTS实验显示了荔枝核总黄酮可明显抑制前列腺癌细胞(PC3、DU145)的体外增殖;平板克隆实验进一步证实了荔枝核总黄酮可抑制前列腺癌PC3、DU145细胞的克隆形成,且与浓度呈正相关;流式细胞术检测发现荔枝核总黄酮可诱导PC3和DU145细胞的凋亡,但对细胞周期无调控作用;细胞划痕和Transwell实验证明了荔枝核总黄酮降低了前列腺癌细胞的迁移和侵袭能力;荔枝核总黄酮诱导前列腺癌细胞的形态发生了明显的改变,并且上调了细胞上皮样蛋白标记物E-cadherin,β-catenin的表达,同时下调了Vimtenin的表达,证实荔枝核总黄酮抑制前列腺癌细胞的转移与EMT相关;通过Western-Blot实验,我们发现了荔枝核总黄酮对pAMPKɑ、Wnt 3a、p-MEK1/2等蛋白无调控作用,但是可显著降低了p-AKT及其下游的p-NF-kB、p-mTOR、p-IκBɑ的表达;结论和应用:荔枝核总黄酮通过抑制AKT信号通路的激活,靶向NF-kB、mTOR双通路,减弱肿瘤细胞EMT的发生,诱导前列腺癌细胞发生凋亡,进而抑制前列腺癌细胞的体外生长和转移。该研究为荔枝核总黄酮的开发和应用提供了理论基础。