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目的：邻苯二甲酸(2-乙基已基)酯（DEHP）是邻苯二甲酸酯类化合物中应用最广的一种，是塑化剂的主要品种。人们可从皮肤、呼吸、口服以及医疗设备的静脉注射等途径接触到DEHP，并且已有报道DEHP的细胞毒性、免疫毒性、遗传毒性、生殖毒性。本研究通过观察DEHP诱导HEK293细胞引起的DNA链断裂，以及ROS的产生、GSH的耗竭、溶酶体膜通透性和线粒体膜通透性的改变，旨在探讨DEHP对DNA损伤的可能毒性机制，为进一步评估DEHP对人类的健康影响提供试验及理论依据。另探究DEHP和乙醇的联合处理是否可增加这2种毒物肾损伤程度。方法：以HEK293细胞作为试验系统。本实验运用单细胞凝胶电泳试验（SCGE）检测DEHP对体外HEK293细胞DNA损伤情况，从而验证DEHP的DNA损伤毒性。为进一步探讨其可能的DNA损伤机制，以2′,7′-二氢二氯荧光素（DCFH）、苯二醛（OPT）、吖啶橙（AO）、罗丹明123（rhodamine123）分别测定DEHP对细胞内活性氧（ROS）、细胞内GSH水平、溶酶体膜稳定性以及线粒体膜稳定性的影响，通过N-乙酰半胱氨酸（NAC）和DL-甲硫氨酸磺酰亚胺（BSO）干预试验观察氧化性损伤在DNA损伤中的作用。DEHP和乙醇的联合作用试验的损伤机制以2′,7′-二氢二氯荧光素（DCFH）、OPT对细胞内活性氧（ROS）、细胞内GSH水平观察。实验结果用SPSS v17.0统计软件进行统计分析。结果：当DEHP作用于HEK293细胞1h后，彗星试验显示DEHP能引起DNA双链断裂，在荧光显微镜下与对照组相比，细胞成彗星样拖尾，而且浓度越大拖尾现象越明显，其中包括尾长的增长，尾DNA%以及DNA%含量明显增大；同时，DEHP可导致细胞内ROS的表达水平升高，GSH的水平下降，溶酶体膜稳定性下降，线粒体膜稳定性下降。用NAC干预1h处理后，DEHP所引起的HEK293细胞的DNA链的断裂、细胞内ROS都有明显地减弱。用BSO干预20h处理后，DEHP所引起的HEK293细胞的DNA链的断裂、细胞内ROS、GSH都有明显地加强。在DEHP和乙醇的联合作用中，彗星实验细胞损伤程度加剧；细胞内ROS的表达水平升高，GSH的水平下降，较单独染毒处理组有显著性差异。结论：DEHP能引起HEK293细胞的DNA损伤，说明DEHP具有遗传毒性，同时，DEHP可导致HEK293细胞内ROS生成增加、GSH的遏制，使细胞处于氧化应激状态，并使溶酶体膜稳定性和线粒体膜稳定性下降。而抗氧化剂NAC在降低了细胞内ROS水平的同时，减弱了DEHP诱导的DNA链断裂程度；BSO在增加ROS生成，遏制GSH的水平，这些结果表明DEHP能引起HEK293细胞内溶酶体膜稳定性和线粒体膜稳定性下降及DNA损伤，其作用机制与氧化应激性有关。DEHP和乙醇的联合作用，可加剧导致HEK293细胞的DNA损伤并使得细胞内ROS生成增加，GSH遏制，使细胞处于氧化应激状态。