中华鲟（Acipenser sinensis）属大型溯河产卵洄游性鱼类,是我国国家一级重点保护动物。20世纪后期,由于水利工程建设、过度捕捞、环境污染及航运等人类活动的干扰,中华鲟赖以生存的栖息生境退化或功能丧失,导致其自然种群严重衰退。长江口是中华鲟幼鱼和成鱼洄游的重要通道,中华鲟在长江口误捕、船舶伤害、搁浅等情况时有发生,需要及时进行救护,开展伤情诊断和治疗,中华鲟的血液细胞、血液生化、行为和生长等生理和行为特征是中华鲟救护诊断和治疗过程中的重要参数和指标。什么是开展中华鲟的血液生理和行为特征研究的适合方法,常用的研究方法对中华鲟的生理和行为特征有什么影响?中华鲟血液生理和行为特征与性别、季节、营养、年龄变化有何关系,存在什么样的关联性?如何确定中华鲟的正常生理和行为特征指标,以及在救护工作中的应用?这些均是中华鲟研究和保护中存在的科学问题,也是本研究的重要内容,具体归纳如下。1.改进了人工条件下中华鲟的生理和行为研究方法。（1）探究了冻存时间对中华鲟血液生化指标测定结果的影响,结果显示,超低温（-80℃）冻存1天对样品生化指标的影响不显著;冻存1周,总蛋白（TP）、球蛋白（GLO）、尿素（UREA）、高密度脂蛋白（HDL）有显著差异（P＜0.05）。研究结果揭示,用于血液生化指标检测的样品应及时检测、避免冻存,确需冻存的样品最好在1周内完成检测,以减少冻存对结果的干扰。（2）开展了离心温度（4℃、25℃）和转速（4000r/min、10000r/min）对中华鲟血液生化指标影响的研究,结果显示,不同离心温度对尿酸（UARE）、钾（K+）有显著影响（P＜0.05）,转速对生化指标无影响。研究结果揭示,中华鲟血清样品制备应在恒定温度下低速离心,建议离心温度和转速为4℃、4000 r/min。（3）开展了抗凝剂（肝素钠、EDTA）对血液生化指标影响的研究,结果显示,乙二胺四乙酸二钾（EDTA-2K）抗凝剂对谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、总胆红素（TBIL）、葡萄糖（GLU）、尿素（UREA）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、尿酸（UARE）、总胆固醇（CHOL）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆汁酸（TBA）和淀粉酶（AMY）检测结果有显著影响（P＜0.05）,肝素钠抗凝剂无显著影响。研究结果揭示,中华鲟血液生化指标检测应以血清样品为主,快速检测时可使用肝素抗凝剂制备血浆。（4）分析了显微镜目视计数法和全自动血细胞分析仪计数法对中华鲟血细胞检测结果的影响,研究结果揭示,由于中华鲟血细胞形态和结构特征与哺乳动物存在较大差异,全自动血细胞分析仪不适用于中华鲟血细胞的检测,在现有技术条件下,中华鲟血细胞计数仍需使用显微镜目视计数法。（5）通过对2尾中华鲟成鱼在人工条件下的行为和生长进行一周年的连续观测,建立了人工条件下中华鲟行为和生长观测方法,结果表明,中华鲟成鱼的游泳、呼吸和摄食行为呈现相似的季节变化特征,雄性成鱼对季节变化比雌性更为敏感,这种敏感性主要体现在摄食行为和生长差异,研究结果揭示,在中华鲟成鱼培育过程中,需提供适宜的养殖环境,促进摄食活动,以提高生长效果,本研究所建立的行为和生长观测方法在中华鲟研究中具有应用价值。2.查明了人工条件下中华鲟生理和行为变化特征。（1）开展了中华鲟血液生理和行为特征的性别差异研究,结果显示,雌性和雄性中华鲟血液生化指标LDL、TG、Ca2+差异显著（P＜0.05）,LDH、HDL、K+、雌二醇（E2）、睾酮（T）、11-酮基睾酮（11-KT）差异极显著（P＜0.01）,血液细胞指标无显著差异（P＞0.05）,摄食比例和摄食频次无显著差异（P＞0.05）,LDH、HDL、LDL、E2、K+雌性显著高于雄性,TG、Ca2+、T、11-KT雄性显著高于雌性,研究结果揭示,中华鲟部分血液生化指标存在性别差异,这种差异与不同性别中华鲟的生理异质性有关,除了性类固醇激素,血液生化指标在中华鲟性别判定上具有潜在的应用价值,值得开展深入研究。（2）开展了中华鲟血液生理和行为特征的季节差异研究,结果显示,中华鲟喜好摄食鲜活饵料,摄食行为季节差异显著（P＜0.05）,且与水温变化存在显著相关性（P＜0.05）,季节变化导致全年适宜生长期较短和饵料摄入量较低,实验中华鲟全年生长缓慢;运用间接生长指标对生长的季节差异进行分析,存在极显著的季节差异（P＜0.01）,说明在中华鲟进入长度生长趋缓的情况下,通过间接生长指标的分析,更能反应出中华鲟的生长特点;血液细胞指标季节差异显著（P＜0.05）,血液生化指标除CK、CHOL、HDL季节差异不显著（P＞0.05）,其余指标均有显著差异（P＜0.05）。研究结果揭示,中华鲟的行为具有典型的季节差异,不同生理指标存在不同季节差异,生理和行为的季节差异主要与水温节律变化有关,因此,在中华鲟培育管理中,应注意加强水温调控,提供适宜条件,改善摄食和生长效果。（3）开展了饵料类型对中华鲟血液生理和生长的影响研究,结果显示,不同饵料类型对中华鲟的生理和生长产生显著影响,鲜活饵料组的K+、11-KT、TP、ALB、GLO含量显著高于饲料组（P＜0.05）,表明鲜活饵料对性腺发育和鱼体免疫力具有促进作用,且生长指标显著高于配合饲料组（P＜0.05）。研究结果揭示,中华鲟虽然能适应长期摄食配合饲料,但其生长性能和健康状况不如摄食鲜活饵料,这种差异与物种的营养需求和饵料的营养组成有关,需要对中华鲟的营养需求作详细的研究,为研制符合中华鲟生长发育需要的优质配合饲料提供技术支撑。（4）中华鲟血液生理特征的年龄差异结果显示,随着年龄增长,中华鲟血液生理指标存在显著差异,不同指标呈现不同的变化规律,ALT、AST、ALP、CREA、UREA、GLU呈下降趋势,LDH、CK、TP、ALB、GLO、CHOL、p H、RBC、E2、T、11-KT呈升高趋势,TG、HDL、LDL、CRP呈先降后升趋势,其余指标虽存在年际间差异但总体上变化较稳定,这种变化主要受随年龄变化而产生的生长发育和代谢水平差异的影响。3.开展了人工条件下中华鲟生理和行为特征在救护中的应用。（1）建立了中华鲟血液生理和行为特征指标参考值,运用统计方法,基于大样本数据,获得34项血液生化指标参考值、8项血液细胞指标参考值、7项行为和生长指标参考值,形成了健康指标体系。（2）基于血液生理指标对患病中华鲟的健康状况进行识别和诊断,发现患“狂游症”疾病和肝胆疾病中华鲟与肝、胆、肾、鳃相关血液生化指标有显著差异,表明血液生化指标可以有效反应出病鱼的生理变化,在中华鲟健康诊断中具有应用价值。（3）运用建立的指标参考值,对患病、受伤、发育异常和健康等不同场景下中华鲟血液生理指标进行评价,验证了所建立的参考值具有较为可靠的适用性,具有实际应用价值。此外,部分指标参考值范围,需要在今后进一步增加样本数据进行优化。（4）基于血液生理指标对受伤中华鲟救护技术进行研究,通过对1尾受伤中华鲟成鱼（编号717）在救护中的生理和行为特征的观察分析,发现救护初期,受伤中华鲟主要存在ALT、AST、呼吸频率、游速超健康指标参考值情况,救护后期,ALT、AST、呼吸频率、游速均恢复至健康参考值范围CK指标存在超健康指标参考值情况,提示在中华鲟检查过程中需注意控制应激状态。建议将受伤中华鲟的救护过程划分为抢救阶段和康复阶段,并采取相适应救护技术措施。4.本研究所建立的健康指标体系和覆盖范围还存在一定的局限性,在今后的研究中还要不断的积累、拓展和完善,需要进一步加强基于健康指标体系在中华鲟保护工作中的应用研究。