背景甲状腺乳头状癌是最常见的内分泌恶性肿瘤,占甲状腺癌的85-90%。原癌基因BRAF在V600E位点的突变是PTC最常见的突变,BRAF^V600E突变与甲状腺外扩张、多灶性、淋巴结转移、晚期TNM有关,其不仅增加了肿瘤的侵袭性,而且增加了疾病的复发率和死亡率。华蟾素是从中华大蟾蜍蟾酥中分离出的天然药物,已被证明具有一定的抗肿瘤活性,由于其毒性极低,用药安全等优点,已被广泛应用于肝细胞癌等的临床治疗。而对其是否及如何影响BRAF^V600E基因突变型甲状腺乳头状癌细胞的增殖和凋亡等的研究仍较少。目的初步探讨华蟾素作用于BRAF^V600E基因突变型甲状腺乳头状癌细胞B-CPAP后,在肿瘤细胞增殖、细胞凋亡、侵袭能力上及蛋白表达等方面的影响及其可能的分子机制。方法1.采用CCK-8细胞活力试剂盒检测20 n M华蟾素干预下化疗药物阿霉素或卡铂对B-CPAP细胞的细胞活力的影响。2.采用流式细胞术检测华蟾素干预后B-CPAP细胞在化疗药物阿霉素或卡铂处理下的凋亡情况。3.通过细胞划痕实验检测华蟾素干预是否对B-CPAP细胞的迁移有影响。4.Transwell细胞侵袭实验检测华蟾素干预对B-CPAP细胞的侵袭的影响。5.蛋白免疫印迹实验检测华蟾素干预下化疗药物阿霉素或卡铂处理后B-CPAP细胞内凋亡相关蛋白的表达情况。结果1.华蟾素处理后,阿霉素与卡铂IC₅₀均显著降低,且阿霉素处理下B-CPAP细胞的细胞活力于72h显著降低（P<0.01）。2.在阿霉素IC₅₀处理条件下,华蟾素干预后,B-CPAP细胞凋亡率显著升高（P<0.01）。3.华蟾素处理对B-CPAP细胞的侵袭及迁移能力无显著影响。4.华蟾素与奎尼丁处理组中阿霉素在B-CPAP细胞内的荧光强度均显著高于对照组（P<0.01）。5.华蟾素与阿霉素联合干预组中,细胞内凋亡相关蛋白Bax和c Casp-3的相对表达水平显著上升,趋势和阿霉素与P-糖蛋白（P-gp）抑制剂奎尼丁联合干预一致。结论华蟾素对甲状腺乳头状癌细胞的迁移和侵袭无显著影响,但其通过P-gp抑制细胞对化疗药物阿霉素的外排作用增加其在细胞内的驻留,并增加凋亡相关蛋白的表达,从而增加甲状腺乳头状癌细胞的化疗敏感性,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。