基于核酸适配体与纳米银作用的无标记比色和化学发光分析

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本论文主要利用纳米银(Silver Nanoparticles, AgNPs)的表面等离子共振(Surface Plasmon Resonance, SPR)性质和催化活性研究与建立了比色分析以及化学发光分析方法,并成功地完成了对腺苷、凝血酶以及IgE等生物分子的检测。主要工作分为以下两个部分:一、基于核酸适配体与纳米银相互作用的无标记比色分析法研究本工作基于核酸适配体保护的纳米银能够抵抗盐诱导团聚的原理,发展了一种可用于检测生物分子腺苷的比色分析方法。核酸适配体首先通过配位作用缠绕吸附在纳米银的表面,由于DNA所带的负电荷增加了纳米银颗粒之间的静电斥力,促使纳米银溶液的稳定性增强,增加盐浓度也不容易发生团聚。当加入与适配体相互作用的目标分子腺苷后,由于适配体与腺苷分子的高亲和力作用使适配体在纳米银表面发生解吸作用。失去适配体保护的纳米银因表面静电斥力的下降而发生团聚,其等离子共振吸收光谱发生改变,利用此性质成功地对腺苷等生物分子进行了检测。该方法易于实现自动化和高通量化。二、基于核酸适配体与纳米银相互作用的无标记化学发光方法研究本工作利用核酸适配体与目标分子的特异性结合实现纳米银的催化化学发光能力的控制,并且建立了检测腺苷分子的分析方法。纳米银表面结合核酸适配体之后其催化化学发光的能力降低甚至丧失,当加入目标分子后,核酸适配体与目标分子结合而脱离纳米银表面,纳米银的催化能力恢复,化学发光信号增强。该方法所需材料简单易得,实验流程也很简单,整个分析方法在均相中完成,能快速进行且适合高通量分析,同时具有很高的灵敏度和良好的选择性,可用于多种物质的检测,如金属离子、小分子、DNA和蛋白质等。
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