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在甘肃和青海两省的21个羊场无菌采集10日龄以内患腹泻症羔羊粪便167份;用轮状病毒-大肠杆菌K99-兰伯氏贾第鞭毛虫-隐孢子虫四联胶体金检测试剂盒检测轮状病毒、兰伯氏贾第鞭毛虫和隐孢子虫;用16S r DNA扩增技术对细菌病原进行鉴定,分离到的103株疑似致病性大肠埃希菌用110只昆明系小鼠进行致病性试验,并对患病小鼠进行病原学、病理学诊断。结果表明,甘青地区致羔羊腹泻症的主要病原是致病性大肠埃希菌,占61.68%,且致病性存在一定差异。利用PCR技术对致病性大肠埃希菌的8种毒力基因进行检测。结果表明甘青地区引起羔羊腹泻症的致病性大肠埃希菌同时携带多种毒力基因,以携带ipa H、eae、stx1的菌株常见。用k-b药敏纸片法对分离的致病性大肠埃希菌进行15种抗生素的药敏试验,表明青霉素和林可霉素的耐药率超过95%,厄他培南、美罗培南、多粘菌素B和硫酸黏菌素敏感,耐药率不超过10%。用PCR技术检测氨基糖苷类、四环素类和β-内酰胺类抗生素耐药基因,并分析其与耐药表型相关性。四环素类耐药基因tet A和tet B的检出率分别为83.50%和68.93%,tet A基因与四环素耐药表型之间存在高度正相关,tet B与四环素耐药表型存在中度正相关;β-内酰胺类相关耐药基因bla TEM、bla SHV的检出率分别为63.11%和56.31%,且两种耐药基因与氨苄西林的耐药表型之间显著相关;氨基糖苷类耐药基因aac(3)-Ⅰ检出率占78.64,且与卡那霉素耐药表型之间存在高度正相关。研究表明,致病性大肠埃希菌是甘青地区引起羔羊腹泻症的主要病原,其致病性之间存在差异,以携带ipa H、eae、stx1毒力基因的菌株常见;致病性大肠埃希菌对青霉素、林可霉素具有很强的耐药性,且多数菌株携带四环素类抗生素耐药基因tet A和tet B、β-内酰胺类抗生素耐药基因bla TEM和bla SHV以及氨基糖苷类耐药基因aac(3)-Ⅰ,各菌株耐药表型与携带的耐药基因之间存在一定的相关性。