论文部分内容阅读
【目的】通过转基因小鼠心肌特异性高表达人热休克蛋白27(Hsp27)模型,探讨人Hsp27对异丙肾上腺素(isoproteronol,ISO)诱导小鼠心脏是否存在早期抑制心肌肥厚的保护作用。 【方法】将编码人Hsp27cDNA克隆入包含有α-MHC启动子的p BSⅡ-SK+的SalⅠ-HindⅢ位点,再将包含有α-MHC启动子、Hsp27cDNA和人生长激素(HGH)的基因显微注射入CBA老鼠成熟的受精卵中。通过PCR筛选成功转入Hsp27的转基因小鼠,western blot验证其在心脏组织特异性高表达。再将筛选的转移基因阳性鼠与野生型C57BL6鼠繁殖,取第六代后的小鼠进行实验。反复PCR鉴定阳性鼠及阴性鼠后,分别以野生型阴性鼠(wild type,WT)和Hsp27转基因阳性鼠(Tg/+)为模型,ISO腹腔注射(30mg·kg-1d-1)7天。同时两组分别注射等量生理盐水(30mg·kg-1d-1)7天,作为对照。实验在规定时间结束后,测定心脏重量与胫骨长度的比值(heart weight to tibia length ratio,HW/TL ratio),小鼠心脏二维超声(echocardiography,echo)测定心脏结构及功能,H&E染色、Masson三色染色观察小鼠心肌重构改变。 【结果】ISO处理后Tg/+组心脏/胫骨比值为0.072±0.003(mg/cm),较生理盐水(saline)对照组比值0.067±0.006(mg/cm)约高7.46%(P>0.01),WT组在ISO作用后鼠的心脏/胫骨比值为0.080±0.009(mg/cm),较saline对照组心脏/胫骨比值0.068±