一株中度嗜盐菌JLT-09的生物学特性初步研究

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从中国内蒙古吉兰泰盐湖的湖水样品中得到一株产碱性蛋白酶的嗜盐菌(最适生长盐浓度为8%-10%左右),在此基础上对它进行了传统表型特征研究,包括形态学观察及生理生化特征的研究,此外,还对其进行了16SrDNA序列分析,结合以上研究初步鉴定该菌是喜盐芽孢杆菌属的一个新菌株,并且为中度嗜盐菌,命名为Halobacillussp.JLT-09。  表型分析显示该菌株呈杆状,革兰氏阴性,有芽孢,无荚膜,无鞭毛,菌落呈现乳白色表面光滑湿润,菌落边缘不是很规则圆滑。最适生长盐浓度是8%-10%,最适生长Mg浓度是3%,最适生长pH是8,最适生长温度是30℃-35℃。能利用山梨醇、蔗糖、甘露醇为唯一碳源生长,但是不能利用葡萄糖、麦芽糖、木糖、淀粉、乳糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖,果糖为唯一碳源。M.R实验和V-P实验测定为阴性,柠檬酸盐利用实验测定为阴性,硝酸盐和亚硝酸盐还原反应为阴性,不产H2S,该菌株不具有淀粉酶、脲酶、酯酶活性,但过氧化氢酶反应为阳性,能产生蛋白酶。  对此菌株产蛋白酶的发酵条件进行优化,结果表明,在以干酪素为碳源和氮源的情况下,当培养基的初始pH为8,培养温度为30℃,接种量为0.5%,培养时间24小时时,培养基的产酶条件最佳。对该菌发酵液进行低温离心、抽滤、超滤、冻干,得到粗酶液,对该粗酶液的性质进行研究,结果表明:酶的最适反应温度为60摄氏度,此酶的热稳定性不好,当温度高于60摄氏度时,酶活基本丧失。该酶在pH为8-10的范围内酶活最高,在pH为6-10之间相对酶活较高,但低于6或者高于11时相对酶活下降较多,因此该酶有一定的耐碱性质,属碱性蛋白酶。
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