不同害虫胁迫下水稻防御化合物比较及相关基因OPR1、PLD3反义抑制水稻品系的建立

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先前研究结果表明,不同取食习性害虫,褐飞虱、稻纵卷叶螟与二化螟为害所激活的水稻信号分子存在明显差异;同时,还发现二化螟为害能明显上调水稻OPR1、PLD3基因的表达水平。为此,本文主要回绕上述两方面内容,分别就不同取食习性害虫与不同信号分子处理所诱导的水稻防御化合物的比较以及反义抑制OPR1、PLD3基因水稻品系的建立展开研究,以期阐明不同取食习性害虫所诱导的防御化合物的异同及其与它们各自所激活的信号途径的关系,并同时为解析OPR1、PLD3基因在水稻诱导防御反应中的作用打下基础。主要结果如下:1)在总的三种害虫取食苗中,共发现有13种化合物,包括momilactone A,momilactoneB和11种未知化合物含量比在相应的对照中显著上升,但在不同取食习性害虫褐飞虱、稻纵卷叶螟与二化螟间,这种诱导作用存在明显差异。两种二萜类化合物momilactone A和momilactone B,只在二化螟为害时含量才明显上升,而在褐飞虱或稻纵卷叶螟为害时,含量均不发生明显变化。在其它未知化合物中,褐飞虱为害能导致水稻茎秆中5种化合物含量显著上升,但对水稻叶片中没有明显影响;二化螟为害时,水稻茎中7种和叶中5种化合物含量显著上升;稻纵卷叶螟为害能引起水稻茎中3种和叶中5种化合物含量上升。在这些化合物中,三种害虫均能诱导含量增加的只有一种化合物;褐飞虱、二化螟能共同诱导上升的4种;褐飞虱与稻纵卷叶螟共同诱导上升的2种;二化螟与稻纵卷叶螟共同诱导的3种。以此13种化合物为参照标准,比较了四种信号分子处理后水稻防御化合物的变化。结果表明,在害虫诱导的13种化合物中,只有6种在各类信号分子处理后含量上升,其中茉莉酸、水杨酸和乙烯处理各导致水稻叶片或茎秆中4种化合物含量上升,过氧化氢处理导致5种化合物含量上升;同时,没有一种害虫所诱导的防御化合物指纹图能以一种信号分子所处理的结果可以说明。因此,褐飞虱、稻纵卷叶螟与二化螟所诱导的防御反应可能是多种信号分子联合作用的结果。2)根据已报道的水稻OPR1和PLD3基因的序列设计引物,克隆了OPR1和PLD3基因片段。以pCambia 1301质粒为载体,构建了OPR1与PLD3基因的反义表达载体。通过农杆菌转化系统,获得了反义抑制OPR1或PLD3基因的水稻品系,为进一步深入研究OPR1与PLD3基因在水稻诱导防御反应中的作用打下了基础。
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