HPLC是中药成分分析最常使用的一种工具，它的便捷高效使得HPLC法成为药物分析最常使用的分离分析方法。因此，采用HPLC技术对中药的成分进行定性和定量分析，是中药研究的基石。通过优化色谱条件模式，实现更全面的定性分析，更精准的定量分析。六神丸是传统中药复方，对于六神丸的成分分析已有报道，但未见对六神丸中极性相对较大部分的分析报道。本文通过优化色谱条件，对复方中药六神丸的成分进行更全面的分析，以利于进一步的药效学研究和药物开发。同时基于对六神丸入血成分的分析鲜有报道，本文将优化的色谱条件应用于研究六神丸在体内（药物进入体内血浆）、体外（与空白血浆混合）成分含量的变化，尝试探索六神丸进入大鼠体内后的相应成分的变化关系，以期望发现六神丸的有效成分和/或毒性成分。　　目的:　　复方中药六神丸中极性相对较强部分色谱峰的分离分析；将六神丸中具有紫外吸收的目标峰实现有效分离，并测定各主要成分的含量；对比六神丸醇提和水提成分的含量差异；建立六神丸进入大鼠体内后血浆中成分的测定方法，并对比六神丸在体内、体外的各指标成分含量的变化。　　方法：　　优化色谱条件使得六神丸中具有紫外吸收的目标峰达到有效分离；利用外标法测定六神丸中主要成分的含量；采用优化的色谱条件检测大鼠血浆中六神丸的成分及其含量。　　结果:　　首次将六神丸中相对强极性部分（如 5-羟色氨）实现有效分离，并将六神丸中14种紫外吸收成分实现有效分离；测定六神丸醇提中5-羟色氨、蟾毒它灵、华蟾毒它灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基、酯蟾毒配基的质量分数分别为0.35%、0.19%、0.18%、0.30%、0.48%、0.52%，六神丸水提分别为 0.40%、0.14%、0.10%、0.10%、0.15%、0.16%；最后发现六神丸经大鼠体内代谢后，蟾毒它灵、华蟾毒它灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基、酯蟾毒配基在血浆中检测不到，而检测到的代谢产物主要为11号和12号物质，且两种代谢产物有良好的浓度-时间依赖性。　　结论：　　本文采用C18色谱柱，通过优化色谱洗脱程序针对性的分离复方六神丸中极性相对较强的目标峰，实现六神丸中相对强极性物质 5-羟色胺等的有效分离，能为传统中药中相对强极性物质的分离提供借鉴参考；所建立六神丸的成分含量测定方法，有利于药物筛选、药物认证和产品质量控制；初步探索了六神丸进入大鼠体内后的代谢规律，为研究六神丸的直接有效成分或毒性成分奠定基础。