前列腺癌是原发于前列腺上皮细胞的恶性肿瘤,在欧美占成年男性恶性肿瘤死亡原因的第二位。近年来,据不完全统计,每年全球有66万人被诊断出前列腺癌,其中约25万死于此疾病。因此针对前列腺癌的相关研究具有重要的意义。Hsp70在许多类型的肿瘤中表达量均比正常要高很多。而正是Hsp70的过表达往往与肿瘤的恶性程度和进展,预后恢复差,转移灶的产生有着联系。同样它也可以保护细胞免于诱导化疗药物和其他应力刺激所产生的凋亡或坏死。事实上,在多种细胞中,将Hsp70敲除,足以引发细胞凋亡。在前列腺癌中Hsp70的表达升高,帮助前列腺癌细胞部分抵抗多种抗癌药物的药效。但是目前对于Hsp70的研究,大部分还是停留在分子伴侣的作用上,而对其在癌症中的调控却鲜有涉及。因此,我们通过多种分子生物学的方法,了解在前列腺癌中,Hsp70-1与AR的相互调控作用,以及Hsp70-1对c-Fos的调节,未了解Hsp70-1在前列腺癌中更多的作用。本课题因此分为以下几个部分：首先体外瞬时转染Hsp70-1的真核表达载体,并通过药物G418的筛选,形成Hsp70-1稳定过表达的LNCaP细胞,利用RT-PCR, Q-PCR, Western blot, siRNA干扰,MTT等手段,观察过表达Hsp70-1后,Hsp70-1对于AR及其信号通路的调控和影响,以及对前列腺癌标志基因的作用。结果显示,过表达Hsp70-1能够上调AR的表达,提高AR的转录活性,并且能激活或者提高前列腺癌相关的Marker基因,抑制抑癌基因PTEN的表达。同时,当Hsp70-1的表达被抑制剂或者siRNA降低时,上述的作用即会减弱甚至消失。其次为了研究AR对于Hsp70-1的调控,本课题采用类似LNCaP-Hsp70-1细胞的筛选方法,筛选出LNCaP-AR细胞。利用RT-PCR, Q-PCR, Western blot, siRNA干扰,ChIP等手段来进行研究。根据己得结果可知,AR对于Hsp70-1的促进作用存在,并且很大可能是通过直接影响Hsp70-1的启动子,来促进Hsp70-1的表达。当AR被siRNA干扰后,其对于Hsp70-1的促进作用减弱或者消失。另外,Hsp70-1的下游的基因调控鲜见报道,我们发现Hsp70-1对前列腺癌进展重要基因c-Fos有明显的调节作用。期望通过Hsp70-1对c-Fos的调控作用的研究来发现更多的Hsp70-1在前列腺癌中的功能。结果显示,Hsp70-1对c-Fos有调控作用,并且会影响Hsf1, Hsf2,后者作用于c-Fos的启动子区域,但是在PC-3和LNCaP细胞中AR介入的c-Fos的调节并不一致,这有待以后的实验进一步的证明及解释。综上所述,Hsp70-1在前列腺癌中和AR具有相互的调节作用,因而Hsp70-1可以成为前列腺癌研究潜在的新靶点,可根据其功能和结构研发低毒,高效的HSP70物或者药剂。同时也为其他的肿瘤研究提供一个更广泛的思路,为其他肿瘤的治疗提供一个有意义的参考。