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目的:1.建立二氧化硅微球载体结合化学发光酶免疫技术检测人IgG方法;2.应用二氧化硅微球载体结合化学发光酶免疫技术建立一种用于检测癌胚抗原(CEA)的方法;3.对所建方法进行应用评价。 方法:1.采用碳二亚胺(EDC)/N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)化学偶联的方法将羊抗人IgG包被于直径为1mm的二氧化硅微球表面，进行包被蛋白浓度、HRP检测抗体稀释度的优化，并将偶联有羊抗人IgG的微球装载于毛细玻管中进行双抗体夹心反应，进行蛋白反应时间、流速对蛋白之间结合效率的影响等方面的优化;2.采用碳二亚胺(EDC)/N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)化学偶联的方法将鼠抗人CEA包被于直径为1mm的二氧化硅微球表面，将其装载于毛细玻璃管中，在微量注射泵的辅助作用下，用双抗体夹心酶免疫法检测CEA。3.通过临床样品检测对所建方法的灵敏度、特异性、精密度、回收率等性能进行初步评价。 结果:1.采用EDC/NHS化学偶联的方法包被羊抗人IgG的最佳浓度为2.6μg/mL，HRP检测抗体稀释度为1∶1000，偶联后的二氧化硅微球进行酶联免疫吸附试验，结果与商业化的试剂盒一致;在微量注射泵的辅助作用下，蛋白之间的结合在20min即可达到平台期，流速状态增加了蛋白之间的碰撞机会，新方法可以在30min内检测到人IgG的最低浓度为0.50ng/mL;2.将偶联有鼠抗人CEA的微球装载于毛细玻璃管中进行CEA的检测，新方法可在30min内完成检测CEA，最低检测浓度达0.54ng/mL，与高浓度甲胎蛋白、间皮素无明显交叉反应，批内、批间CV为10.53％～14.22％，回收率为91.2％～104.65％，与电化学发光酶免疫分析结果差异无统计学意义（t=0.533，P=0.597），且成正相关(r=0.98 P＜0.01)。 结论:1.二氧化硅微球作为载体进行ELISA反应，成本较低，同时也节约蛋白试剂，在微量注射泵的作用下，蛋白之间的反应加速，可以节约反应时间，采用化学发光酶免疫技术，灵敏度较好，线性范围比较广;2.基于微流控和化学发光酶免疫技术的原理在毛细玻璃管中检测CEA，操作简便、快速、灵敏度高且成本低，方法学性能良好。