论文部分内容阅读
近年来,我国水产养殖业迅猛发展,随着集约化、高密度养殖规模日益扩大,氮素污染也在逐渐加剧。氮素是引起养殖水体恶化的主要污染物之一,不但会对水生生物(鱼、虾和蟹等)产生巨大危害,也会引起严重的环境问题(赤潮等),甚至会通过富集作用对人体造成伤害。生物法脱氮处理养殖废水是目前最经济有效的方法之一。硝化细菌在生物法脱氮过程中起着重要作用。本研究从罗非鱼(Oreochromis spp)循环水养殖车间养殖用水中筛选出3株具有高效脱氮能力的异养硝化细菌,对其进行分类和鉴定,并研究其硝化性能。使用筛选得到的3株菌处理罗非鱼养殖池塘,研究其对池塘养殖环境的修复效果。主要研究结果如下:1异养硝化细菌P5-2的分离鉴定及其脱氮性能研究从养殖用水中筛选出一株异养硝化细菌P5-2。通过形态观察、生理生化反应鉴定及16S rRNA基因序列分析,确定该菌株为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)。革兰氏染色结果表明该菌株为革兰氏阳性菌;胞外酶性能测定表明菌株可以有效利用淀粉及酪蛋白;生长特性研究结果表明,当培养温度为30℃、盐度为10‰、pH为7时,菌株生长最快,最先进入指数生长期及稳定期。硝化特性实验结果显示,碳源、碳氮比(C/N)、溶氧量等环境因素均可以影响菌株对氨氮(NH4+-N)的去除效果,当以柠檬酸钠为碳源、碳氮比为15、pH为7、转速180 r/min时菌株去除氨氮的效果最佳,24 h的氨氮去除率达99.07%。2异养硝化细菌P3-1的分离鉴定及其脱氮性能研究从养殖用水中筛选出一株异养硝化细菌P3-1。通过态观察、生理生化反应鉴定及16S rRNA基因序列分析,确定该菌株为粪产碱杆菌(Alcaligenes faecalis)。革兰氏染色结果表明该菌株为革兰氏阴性菌;胞外酶性能测定表明菌株可利用酪蛋白,不能利用淀粉;生长特性研究结果表明,当培养温度为30℃、盐度为10‰、pH为7或9时,菌株生长最快,最先进入指数生长期及稳定期。硝化特性实验结果显示,碳源、碳氮比(C/N)、溶氧量等环境因素均可以影响菌株对氨氮的去除效果,当以柠檬酸钠为碳源、碳氮比为10、pH为7、转速180 r/min时菌株去除氨氮的效果最佳,24 h的氨氮去除率达96%。3异养硝化细菌P1-2的分离鉴定及其脱氮性能研究从养殖用水中筛选出一株异养硝化细菌P1-2。通过形态观察、生理生化反应鉴定及16S rRNA基因序列分析,确定该菌株为嗜吡啶红球菌(Rhodococcus pyridinivorans)。革兰氏染色结果表明该菌株为革兰氏阳性菌;胞外酶性能测定表明菌株可利用酪蛋白,不能利用淀粉;生长特性研究结果表明,当培养温度为40℃、盐度为10‰、pH为7时,菌株生长最快,最先进入指数生长期及稳定期。硝化特性实验结果显示,碳源、碳氮比(C/N)、溶氧量等环境因素均可以影响菌株对氨氮的去除效果,当以柠檬酸钠为碳源、碳氮比为15、pH为7、转速180 r/min时菌株去除氨氮的效果最佳,24 h的氨氮去除率达99.63%。4异养硝化细菌对罗非鱼养殖水环境修复效果研究将菌株P1-2、P3-1、P5-2泼洒至尼罗罗非鱼养殖池,实验组菌液终浓度为5.0×105cfu/mL,空白对照组和增氧对照组泼洒等体积生理盐水。每隔7 d处理一次。通过检测水体指标的变化来评价3株菌对养殖池塘环境的修复效果。实验结果显示:(1)菌株P5-2对养殖水体的氨氮(NH4+-N)、总氮(TN)、亚硝酸盐氮(NO2--N)和总磷(TP)的去除率显著高于空白对照组(P<0.05);对底泥NH4+-N和TN的去除率分别为65.63%和55.35%,显著高于空白对照组(P<0.05),对底泥有机质的去除率显著高于空白对照组(P<0.05)。(2)菌株P3-1对养殖水体的NH4+-N、TN、NO2--N和TP去除率显著高于空白对照组(P<0.05);对底泥NH4+-N和TN的去除率分别为40.8%和59.23%,显著高于空白对照组(P<0.05)。(3)菌株P1-2对养殖水体的NH4+-N和TN去除率显著高于空白对照组(P<0.05);对底泥NH4+-N和TN的去除率分别为60%和51.9%,显著高于空白对照组(P<0.05)。上述结果表明,3株菌均可在养殖水体和池塘底泥中进行硝化作用,显著降低氨氮和总氮,改善养殖环境。