【摘 要】
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[目的]定量研究卢戈氏碘液(I2KI)染色增强应用于Micro-CT软组织精确成像的最佳浓度和时间,以及I2KI染色对组织收缩率和后续HE切片质量的影响,以期为临床肿瘤成像研究探索新方法。[方法](1)新西兰大白兔舌体组织12个(体积:0.386±0.028mm3),随机分为4组,置于10%中性福尔马林溶液(10%neutral buffered formalin,10%NBF)中充分固定12h,
【基金项目】
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南京市医学科技发展课题(YKK18120); 江苏省重点研发计划项目(社会发展)临床医学前沿(BE2018618); 科教强卫工程江苏省医学重点学科(苏卫科教(2017)1号)
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[目的]定量研究卢戈氏碘液(I2KI)染色增强应用于Micro-CT软组织精确成像的最佳浓度和时间,以及I2KI染色对组织收缩率和后续HE切片质量的影响,以期为临床肿瘤成像研究探索新方法。[方法](1)新西兰大白兔舌体组织12个(体积:0.386±0.028mm3),随机分为4组,置于10%中性福尔马林溶液(10%neutral buffered formalin,10%NBF)中充分固定12h,然后分别于1%,3%,5%,7%浓度(单位w/v)的I2KI溶液中浸染,第12h、24h、36h、48h、60h、72h行Micro-CT扫描成像,并每隔12h更换新配置的I2KI溶液;然后对Micro-CT成像质量进行主观评价及客观评价,从而确定I2KI染色的最佳浓度及最佳时间。(2)在第1部分处理基础上,再设置I2KI浓度为0%对照组,当第1部分中各组样本染色结束后,行常规病理HE切片检查评估I2KI染色对HE切片质量的影响,然后将Micro-CT图像可识别兔舌组织结构与HE切片图像进行对比,初步评估Micro-CT图像的软组织分辨能力。(3)在第(1)步基础上,同时设置I2KI浓度为0%对照组,然后各组样本在10%NBF固定的12h中,每4h用分析天平法测量一次体积;在I2KI染色之后,将各组样本在6个时间点扫描的Micro-CT图像数据导入Mimics软件3D重建并测量体积,然后统计样本体积收缩率。[结果](1)各组成像最佳时间分别为:1%组60h,3%组48h~60h,5%组24h,7%组12h;组间图像质量评价:3%组最高,提示I2KI最适染色浓度为3%。与3%组相比,1%组与5%组稍低(P>0.05),7%组最低(P0.05),切片质量优秀,完全满足诊断需求;5%组与对照组有统计学差异(P<0.001),切片质量稍差,但不影响诊断,7%组与对照组有统计学差异(P<0.001),切片质量差,不能用于诊断。I2KI增强Micro-CT图像可以清晰的分辨微小血管、细小肌肉纤维及其走行、粘膜层以及粘膜下层等结构,组织分辨能力与相同放大倍率HE切片图像相似。(3)I2KI浓度越高,染色时间越长,组织收缩率越大;84h累计收缩率:对照组 26.0± 1.5(%),1%组18.8±1.8(%),3%组 31.3±0.9(%),5%组45.5±0.8(%),7%组59.8±0.8(%),各组间比较均有统计学差异(P<0.001)。[结论]低浓度(1%~3%w/v)I2KI染色增强Micro-CT软组织精确成像质量优,组织分辨能力高,组织收缩率小,且对HE切片质量无明显影响。此成像技术可用于辅助HE切片进行组织结构观察。
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