微RNA(microRNA,miRNA)是一类在进化上高度保守、长度约20～24个核苷酸的小分子非编码RNA,能通过与靶基因3非翻译区相结合,从而抑制靶基因的翻译或降解靶基因。Let-7 microRNA是发现较早的一类miRNA,最早在线虫上发现let-7能调控细胞分裂的时序。此后大量证据表明,let-7参与动物多个器官发育的调控过程,并与人类疾病发生密切相关。本研究利用real-time PCR技术检测了let-7家族8个成员在小鼠胚胎肺发育过程中的表达趋势,发现从小鼠假腺肺的前中期到囊状肺的前期,let-7家族8个成员均有表达,且表达量均持续升高,到囊状肺的中后期,其中let-7a、let-7d、let-7e、let-7f、let-7i五个家族成员表达量略有下降,let-7b、let-7c表达量没有明显变化、而let-7g表达量则有所升高。接着,本实验选取8个家族成员中表达丰度最高的let-7a和let-7d,利用原位杂交技术分析它们在小鼠胚胎肺发育过程中的表达模式,结果表明:let-7a和let-7d在小鼠胚胎肺的上皮和间充质中均有明显表达,且在肺芽远端上皮末梢中的表达较为强烈,到出生后三天(P3),其在胚胎肺上皮和间充质中的表达减弱,这种表达趋势的变化与real-time PCR的结果相近。在此基础上,本实验通过构建pDC316-CMV-control、pDC316-CMV-let-7a以及pDC316-mCMV-mK-ras三个腺病毒表达载体,并将其分别转染细胞,利用RT-PCR以及western blot的方法检测所构建的表达载体,实验结果表明,以pDC316-CMV-control作为对照组,pDC316-CMV-let-7a、pDC316-mCMV-mK-ras两个腺病毒表达载体在mRNA水平及蛋白质水平上均能实现体外过表达。本研究旨在为后期构建腺病毒,并在小鼠体内研究let-7 miRNAs与mK-ras基因负调控关系,及其参与调控哺乳动物胚胎肺发育的分子机制奠定基础。