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目的观察不同时间持续缺氧孵育83213胰岛β细胞后,自噬相关蛋白Beclin1、LC3BII、P62的表达情况,从而判断自噬的活性变化。方法1.将符合实验条件的83213胰岛细胞作为研究对象,随机分为常氧组(对照组)、缺氧组(处理组),对照组用常氧(21%O2)培养,缺氧组为持续缺氧(1%O2,5%CO2)2h、3h、6h、12h、24h、48h胰岛细胞,提取各组胰岛细胞的总蛋白并检测其浓度。2.采用Western Blot蛋白印记方法测定对照组和缺氧组缺氧诱导因子HIF-1a蛋白的表达,以反映常氧组及缺氧组各时相点HIF-1α的动态变化。3.采用Western Blot蛋白印记方法,检测常氧组、缺氧组自噬相关蛋白Beclin1、LC3BⅡ、P62表达情况,以反映对照组及缺氧处理后各时相点自噬水平的动态变化。结果1.与常氧组比较,缺氧2h、3h、6h、12h、24h、48h组HIF-1α蛋白表达均升高,在24h达高峰,且差异均有统计学意义(P<0.05)2.与常氧组比较,缺氧2h胰岛细胞的Beclin1水平升高,于缺氧3h达高峰,缺氧6h时有下降趋势,但仍高于常氧组,差异有统计学意义(P<0.05);缺氧12h、24h、48h组Beclin1水平均低于常氧组,差异有统计学意义(P<0.05)。与常氧组比较,自噬相关蛋白LC3BⅡ在缺氧2h、3h、6h升高,差异有统计学意义(P<0.05),并在3h达峰,自缺氧12h后LC3BⅡ逐渐下降,且低于常氧组,差异有统计学意义(P<0.05)。与常氧组比较,缺氧2h、3h组P62蛋白降低,缺氧3h与之相比差异有统计学意义(P<0.05),于缺氧6h逐渐升高,缺氧12h、24h、48h组差异有统计学意义(P<0.05),并在缺氧24h达高峰。结论1.在持续缺氧情况下,胰岛β细胞的HIF-1α表达水平增加。2.在一定时间缺氧情况下,自噬相关蛋白Beclin1和LC3BⅡ表达水平增加,P62表达水平下降,反映胰岛β细胞自噬增强;但超过某个时间点,Beclin1和LC3BⅡ表达水平下降,P62表达水平上升,反映随着缺氧时间进一步延长,自噬不再增强,反而减弱。细胞的生存状态与缺氧的时间和强度有关。在短时间缺氧条件下,自噬可能参与对胰岛β细胞的保护。