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目的:制作新型孔径梯度支架,比较梯度支架与均匀支架在孔径、孔隙率、抗压强度等方面的差别,并比较成骨细胞在不同支架上的生物学行为,评价梯度结构对于成骨细胞的影响。 方法:用羟基磷灰石(Hydroxyapatite,HA)为原料,蜡球作为造孔剂制作孔径梯度支架。将特定直径的蜡球与HA溶胶混合压制成圆柱形,并比较孔径梯度支架相较于均匀支架的物理学性能等方面的差异,与SD大鼠颅盖骨来源的成骨细胞培养,通过流式细胞仪检测成骨细胞在支架上的增殖潜能、测定ALP活性、检测OPN和OCN的基因表达,观察孔径结构对成骨细胞的影响。 结果:通过蜡球造孔剂法制备的梯度支架,可有效设计控制其内部结构,孔隙高度互联,相互贯通;支架烧结后进行物相检测,HA粉末与烧结后支架研磨粉末XRD特征峰相同,无杂质掺入;扫描电镜结果显示梯度支架外层孔径大,内层孔径小,孔隙率高;抗压实验显示梯度结构可增强支架的抗压强度;通流式细胞仪检测成骨细胞的增殖指数(PI),发现梯度结构可促进细胞增殖,且促进成骨的最适孔径约在350μm~400μm之间;成骨细胞ALP活性、OCN、OPN基因表达量在D300组支架中明显升高,提示小孔径可促进成骨细胞分化;细胞骨架染色显示D-Gradient组支架表面细胞有最多量的细胞黏着以及更清晰的肌动蛋白纤维,梯度结构可促进细胞的迁移,改善细胞在支架内的分布。 结论:梯度支架孔隙率>70%,保证营养及氧气流通时保证支架的物理性能;梯度孔径支架促进成骨细胞在支架表面的增殖、粘附及迁移,为骨组织工程支架材料设计提供重要的参考价值。