电针不同穴位对实验性类痛经大鼠镇痛效应及其机理的研究针灸学认为刺激穴位可特异性地对相应脏腑器官产生调治作用,这种作用与非穴和其它经穴比较存在差异。这种差异就是经穴效应的特异性。经穴效应特异性是经络学说的核心内容,是针灸临床循经取穴的重要依据。而且大量临床实践及实验研究都证实穴位效应确实存在特异性。现代神经科学对针灸机理的研究结果已显示经穴效应存在特异性。但这种特异性的产生主要是由于支配穴位所在部位的神经节段的不同而引起的。它主要与穴位所在的部位有关,而与经典针灸理论所强调的穴位所处的“经”关系不大。即处于同神经节段的不同经脉上的穴位、相同经脉上的不同穴位以及与非穴位间的效应不存在差异。那么,经穴效应特异性到底为何?同神经节段内非穴位以及不同经脉上的穴位间是否存在效应特异性?相同经脉上不同穴位间的效应又如何呢?本研究以实验性类痛经大鼠模型为研究对象,从电针镇痛作用及机制入手,观察电针同神经节段支配的胞宫相关经穴、非相关经穴以及非经非穴对实验性类痛经大鼠的行为学反应、子宫平滑肌收缩力、子宫组织局部致痛物质以及中枢痛觉调制系统的影响,探讨同神经节段支配的经穴与非经穴、相关经穴与非相关经穴,以及同一经脉不同穴位间是否存在经穴效应特异性以及经穴效应特异性是否具有一定的规律。为经穴效应特异性的研究提供系统有力的实验依据。实验中所选经穴为：相关经穴为足太阴脾经三阴交、血海穴；非相关经穴为足少阳胆经悬钟穴；非经非穴为胆经与胃经之间平悬钟穴处的非经非穴点。实验选用动情间期SD雌性大鼠156只,按照随机数字法分为盐水组、模型组、电针三阴交组、电针血海组、电针悬钟组、电针非穴组6组,每组26只。除盐水组外,其余各组大鼠均皮下注射苯甲酸雌二醇连续10天,第1、10天每只大鼠皮下注射0.5 mg,第2-9天每只均皮下注射0.2mg。末次给药1h后,腹腔注射缩宫素2u／只。盐水组每日给予同等剂量的生理盐水。根据Schmauss行为学评分标准,记录20分钟内扭体反应的潜伏期、扭体评分及扭体次数；应用BL-420E+生物机能实验系统记录仪记录20分钟内大鼠子宫收缩次数和强度；采用放射免疫法检测子宫前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2α(PGF2α)含量；采用免疫组化法检测脊髓背角内K-阿片受体表达；采用ELISA法定量检测中脑中央导水管周围灰质(PAG)中脑啡肽(ENK)、β内啡肽(β-EP)、强啡肽(Dyn)、内吗啡肽(EM)的含量。实验结果如下：1电针不同经穴对大鼠行为学反应的影响模型组与盐水组相比：扭体潜伏期明显缩短,扭体评分、扭体次数明显增高,均有统计学意义(P＜0.01)；说明模型制备成功。三阴交组扭体潜伏期与模型组相比明显延长,差异有统计学意义(P＜0.05),其余各组扭体潜伏期与模型组相比亦延长,但差异无统计学意义(P＞0.05)；扭体评分和次数各组与模型组相比均明显减少,差异有统计学意义(P＜0.01)。但三阴交组扭体评分与盐水组相比差异亦无统计学意义(P＞0.05)。说明电针不同穴位后,可减轻实验性类痛经大鼠的扭体反应,其中电针三阴交穴的效应最佳,而血海穴、悬钟穴与非穴间的效应无明显差异。2电针不同经穴对大鼠子宫收缩程度的影响模型组与盐水组相比：子宫收缩次数明显增加,子宫收缩强度明显增强,差异均有统计学意义(P＜0.01)；说明造模后子宫平滑肌出现痉挛性收缩。三阴交组和血海组的子宫收缩次数与模型组相比均减少,差异有统计学意义(P＜0.05),悬钟组和非穴组的子宫收缩次数与模型组相比亦减少,但差异无统计学意义(乃0.05);三阴交组的子宫收缩强度与模型组相比明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05),其余各组的子宫收缩强度与模型组相比亦降低,但差异无统计学意义(P＞0.05)。除非穴组外,其余各组的子宫收缩强度与盐水组相比,差异均无统计学意义(P＞0.05)。结果说明：电针穴位后,可调节实验性类痛经大鼠子宫痉挛性收缩程度,从而缓解痛反应。其中,电针三阴交穴的效应最佳,血海穴和悬钟穴亦有一定的缓解效应,血海穴较悬钟穴效应稍佳。非穴的效应无明显改变。3电针不同经穴对大鼠子宫PGE2、PGF2α含量及PGE2／PGF2α比值的影响模型组与盐水组相比：PGF2α含量明显增高,PGE2含量明显降低,比值明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01)；说明造模后,子宫组织中致痛物质含量升高。各电针组PGF2α含量与模型组相比均明显降低,差异有统计学意义(三阴交：P<0.05；其余各组：P<0.01)。三阴交组PGE2含量与模型组相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),且与盐水组相比差异无统计学意义(P>0.05),三阴交组PGE2含量比其它各组均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01)；其余各组PGE2含量与模型组相比均无明显升高,差异无统计学意义(P＞0.05)。各电针组比值与模型组相比均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01),且三阴交和悬钟组比值与盐水组相比差异亦无统计学意义(P＞0.05)。结果说明：电针穴位后,可通过调节实验性类痛经大鼠子宫组织致痛物质的含量而达到镇痛作用。综合效应来看,三阴交组的调节作用较强,其余各组间效应无明显差异。4电针不同经穴对大鼠各节段脊髓背角K-阿片受体表达的影响针刺不同穴位及非穴对各脊髓节段K-阿片受体表达的影响不同。T13节段：模型组与盐水组相比：IOD值升高,但差异无统计学意义(P＞0.05)三阴交和血海组的IOD值与模型组相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)；悬钟和非穴组的IOD值与模型组相比亦有升高,但差异无统计学意义(P＞0.05)。三阴交和血海组的IOD值与非穴相比明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01)。L1节段：模型组与盐水组相比：IOD值升高,但差异无统计学意义(P＞0.05)三阴交和血海组的IOD值与模型组相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)；悬钟和非穴组的IOD值与模型组相比亦有升高,但差异无统计学意义(P＞0.05)。三阴交和血海组的IOD值与悬钟组和非穴组相比明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01)L2节段：模型组与盐水组相比：IOD值升高明显,差异有统计学意义(P＜0.01)三阴交和血海组的IOD值与模型组相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)；悬钟和非穴组的IOD值与模型组相比亦有升高,但差异无统计学意义(P＞0.05)。三阴交组的IOD值与非穴组相比明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01)。三阴交组的IOD值较血海和悬钟组也明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01)。L6节段：模型组与盐水组相比：IOD值升高,但差异无统计学意义(P＞0.05)三阴交、血海和非穴组的IOD值与模型组相比明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01);悬钟组的IOD值与模型组相比亦有升高,但差异无统计学意义(P＞0.05)。三阴交组的IOD值与非穴组相比升高,差异有统计学意义(P＜0.05)。三阴交和血海组的IOD值均较悬钟组明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01)。S1节段：模型组与盐水组相比：IOD值升高,但差异无统计学意义(P＞0.05)三阴交、血海和悬钟组的IOD值与模型组相比明显升高,差异有统计学意义(三阴交：P＜0.01,血海、悬钟：P＜0.05)；非穴组的IOD值与模型组和盐水组相比差异均无统计学意义(P＞0.05)。三阴交组的IOD值与非穴相比明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01)。三阴交组的IOD值较血海组亦明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05)。以上结果说明：电针可调节各脊髓节段背角内κ-受体的表达,但不同穴位对不同节段调节的强度不同。三阴交和血海穴在各节段都有调节作用,三阴交穴的调节作用较血海穴明显；悬钟穴和非穴也有一定的调节作用,但作用均较三阴交和血海穴组弱。悬钟和非穴间无明显差异。5电针不同经穴对PAG内阿片肽物质的影响5.1电针不同经穴对大鼠PAG内ENK含量的影响：模型组与盐水组相比：PAG内ENK含量有所升高,但差异无统计学意义(P＞0.05)。说明实验性类痛经模型使大鼠PAG内ENK含量升高不明显。三阴交和悬钟组的ENK含量与模型组相比明显升高,差异有统计学意义(三阴交：P＜0.01；悬钟组：P＜0.05)；血海和非穴组的ENK含量与模型组相比亦有升高,但差异无统计学意义(P＞0.05)。三阴交组的ENK含量与血海、悬钟和非穴组相比明显升高,差异有统计学意义(血海、非穴：P＜0.01,悬钟：P＜0.05)。悬钟与血海的组间差异无统计学意义(P＞0.05)。说明电针穴位可调节大鼠PAG内ENK含量的水平,但调节程度不同。三阴交和悬钟穴可明显调节PAG内ENK含量,其中以三阴交穴较好。而电针血海穴和非穴无明显变化。5.2电针不同经穴对大鼠PAG内β-EP含量的影响：模型组与盐水组相比：PAG内β-EP含量有所升高,但差异无统计学意义(P＞0.05)。说明实验性类痛经模型使大鼠PAG内β-EP含量升高不明显。三阴交和悬钟组的β-EP含量与模型组相比明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01)；血海和非穴组的β-EP含量与模型组相比亦有升高,但差异无统计学意义(P＞0.05)。三阴交和悬钟组β-EP含量与非穴相比均明显升高,差异有统计学意义(三阴交：P＜0.01；悬钟组：P＜0.05)。三阴交与血海和悬钟组相比差异均有统计学意义(P＜0.01)。悬钟与血海组间差异无统计学意义(乃0.05)。说明电针穴位可调节大鼠PAG内β-EP含量的水平,但调节程度不同。三阴交和悬钟穴可明显调节PAG内β-EP含量,其中以三阴交穴较好。而电针血海穴和非穴无明显变化。5.3电针不同经穴对大鼠PAG内Dyn含量的影响：模型组与盐水组相比：PAG内Dyn含量有所升高,但差异无统计学意义(P＞0.05)。说明实验性类痛经模型使大鼠PAG内Dyn含量升高不明显。三阴交和悬钟组的Dyn含量与模型组相比明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01)；而血海和非穴组的Dyn含量与模型组相比亦有升高,但差异无统计学意义(P＞0.05)。三阴交组Dyn含量与非穴组相比明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01)。三阴交与血海和悬钟组相比差异均有统计学意义(P＜0.01)。悬钟与血海组间差异无统计学意义(P＞0.05)。说明电针穴位可调节大鼠PAG内Dyn含量的水平,但调节程度不同。三阴交和悬钟穴可明显调节PAG内Dyn含量,其中以三阴交穴较好。而电针血海穴和非穴无明显变化。5.4电针不同经穴对大鼠PAG内EM含量的影响：模型组与盐水组相比：PAG内EM含量有所升高,但差异无统计学意义(P＞0.05)。说明实验性类痛经模型使大鼠PAG内EM含量升高不明显。各组EM含量与模型组相比均有升高,但差异无统计学意义(P＞0.05)。说明：针刺各穴位及非穴均无明显调节大鼠PAG内EM含量的作用。综上所述：电针不同经穴可引起实验性类痛经大鼠PAG内阿片肽含量发生变化,说明针刺可通过调节脑内阿片肽的水平而起到镇痛作用。但电针不同经穴及非穴对PAG内阿片肽含量的影响不同。在电针同神经节段的三个穴位中,三阴交和悬钟穴均可使ENK、β-EP和Dyn的含量升高,三阴交穴的升高效应较明显,悬钟次之,而血海和非穴无明显调节作用；四个穴位对EM的含量均无明显调节作用,说明EM可能不参与电针对内脏痛的调节。结论电针同神经节段支配的穴位与非穴位对内脏痛均有镇痛作用,但它们的镇痛效应不同,相关经脉上的特定穴镇痛效应最佳,相关经脉上的非特定穴与非相关经穴效应相近,并且与非穴的效应也相近。针刺穴位可通过调节子宫功能状态和中枢内痛觉调制系统来达到对内脏痛的镇痛作用。并且不同穴位对各部位的调节作用不同。相关经脉上的穴位较之非相关经脉上的穴位以及非穴有更明显的脊髓节段性调节作用,其中以相关经脉中的特定穴作用最强；相关经脉和非相关经脉上的特定穴对脊髓上中枢均有调节作用,但相关经脉上特定穴的调节作用更明显；相关经脉上的非特定穴和非穴无明显调节作用。因此,穴位不同,其调节机制不同,从而产生的效应就不同。由此认为：经穴效应具有特异性,这种特异性是相对的,而不是绝对的。经穴效应特异性虽与其所处的神经节段密切相关,但与其所在的“经”可能有更加密切的联系。