大连紫海胆棘壳色素的研究

来源 :大连工业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:toboho
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海胆属于棘皮动物门海胆纲,其可食用部分是生殖腺,大量的棘壳作为加工废物被丢弃。研究表明,海胆棘壳中含有多羟基萘醌类色素物质,它们具有抗菌、保护心脏、抗氧化等诸多生理活性。大连紫海胆(学名光棘球海胆)是我国主产的经济海胆之一,本文采用大孔吸附树脂对其棘壳中的多羟基萘醌类色素进行了制备,并研究了色素提取物的理化性质、化学结构和生理活性。首先,采用NKA-9大孔吸附树脂以静态吸附的方式制备出棘壳色素提取物,并研究了提取物的理化性质及稳定性。结果显示:色素在极性大的溶剂如去离子水、甲醇、乙醇中溶解性较好,在极性小的溶剂如石油醚、正己烷中溶解性差。色素在pH≥6的缓冲溶液中颜色会发生变化,由橘红色变为土黄色,相比较而言在偏酸性条件下稳定性较好。色素的耐热性较好,但耐光性较差。Na2SO3、苯甲酸钠和山梨酸钾会改变色素的颜色并使稳定性的下降;H2O2、NaCl、柠檬酸、苹果酸不会对色素颜色构成不良影响,但会使色素稳定性的下降。Vc对色素有护色增色作用。Mn2+、Mg2+不影响色素溶液的色泽,对色素的稳定性也没有影响;Ca2+、Zn2+不影响色素溶液的色泽,但使色素溶液的稳定性下降;Al3+、Fe3+与色素发生螯合,生成带电荷螯合物,改变色素的色泽,但不产生沉淀;Fe2+、Cu2+与色素螯合形成不带电荷螯合物,不溶于水。接着,采用超高效液相色谱-飞行时间质谱对色素提取物进行快速分析。结果表明,该提取物中含有8个1,4-萘醌类天然色素,分别被初步鉴定为2,3,5,6,7,8-六羟基-1,4-萘醌、氨基-五羟基-1,4-萘醌、2,5,7,8-四羟基-1,4-萘醌、2,3,5,7-四羟基-1,4-萘醌、乙酰基-氨基-三羟基-1,4-萘醌、3-乙酰基-2,5,6,7,8-五羟基-1,4-萘醌、3-乙酰基-2,5,7,8-四羟基-1,4-萘醌和6-乙基-2,3,5,7,8-五羟基-1,4-萘醌。采用半制备高效液相色谱对色素提取物进行分离纯化。结果显示,四个组分可以实现制备,其可能结构分别为2,3,5,6,7,8-六羟基-1,4-萘醌、2,3,5,7-四羟基-1,4-萘醌、3-乙酰基-2,5,6,7,8-五羟基-1,4-萘醌和3-乙酰基-2,5,7,8-四羟基-1,4-萘醌。最后,研究了棘壳色素提取物的体外抗增殖、抗炎、免疫调节活性及所纯化的色素组分的体外抗氧化活性。结果显示:海胆棘壳色素在浓度为0.5和1μg/mL时对人宫颈癌Hela细胞具有显著的抑制作用(P<0.05),在浓度为2μg/mL时具有极显著的抑制作用(P<0.01);海胆棘壳色素在浓度为1 μg/mL时对LPS刺激的RAW264.7细胞增殖具有显著的抑制作用(P<0.05),在浓度为5-10 μg/mL时具有极显著的抑制作用(P<0.01);海胆棘壳色素在浓度为20 μg/mL时,可显著地(P<0.05)提高脾淋巴细胞增殖活性,浓度为50 μg/mL时,可极显著地(P<0.01)提高脾淋巴细胞的增殖活性。四个色素组分均具有很强的体外抗氧化活性,在0.4 mg/mL浓度时,组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ的DPPH自由基清除率分别为60.70,86.49,70.79和85.14%;还原能力(A700nm)分别为0.491、0.860、0.652和0.825;对Fe2+的螯合率分别为43.78、31.66、53.54和72.57%。
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