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大蒜病毒病害是造成大蒜产量损失和品质下降的重要原因,每年因大蒜病毒造成的损失巨大。近年来,随着各国间贸易往来的日趋频繁,使得大蒜病毒在全球范围大面积传播,给大蒜生产带来了巨大的危害。侵染大蒜的植物病毒主要包括香石竹潜隐病毒属(Carlavirus)的葱潜隐病毒(Shallot latent virus, SLV)、大蒜普通潜隐病毒(Garlic common latent virus, GarCLV),马铃薯X病毒属(Potxvirus)的燕X病毒(Scallion visus x, ScaVX),马铃薯Y病毒属(Potyvirus)的洋葱黄矮病毒(Onion yellow dwarf virus, OYDV)、韭葱黄条病毒(Leek yellow stripe virus, LYMV),以及葱属X病毒属(Allexivirus)的大蒜A病毒(Garlic virus A, GarV-A)、大蒜B病毒(Garlic virus B, GarV-B)、大蒜C病毒(Garlic virus C, GarV-C)、大蒜D病毒(Garlic virus D, GarV-D)、大蒜E病毒(Garlic virus E, GarV-E)和大蒜X病毒(Garlic virus X, GarVX)。从六安市金安区采集有明显花叶或斑驳症状的大蒜新鲜叶,提取总RNA并合成cDNA。根据已报道的大蒜X病毒(Garlic virus X, GarVX)、韭葱黄条病毒(LYSV)序列和洋葱黄矮病毒(OYDV)序列设计特异引物,分别扩增GarVX、LYSV和OYDV的全长外壳蛋白(CP)基因。将GarVX、LYSV和OYDV的全长外壳蛋白(CP)基因插入原核表达载体pSBET后在大肠杆菌BL21 (DE3)plys S中诱导表达。通过12% SDS-PAGE和5%-20%梯度SDS-PAGE二次制备电泳纯化诱导产物,免疫小鼠,获得经过Western blot分析为特异的抗CP血清。硫酸铵沉淀法与Protein A-Red Sepharose亲和层析相结合提取IgG,获得效价达1：3800-1：5000的一抗,研制了用血清学方法检测GarVX、LYSV和OYDV病毒的试剂盒。对大蒜田间样品的间接ELISA检测表明,GarVX、LYSV和OYDV在田间普遍发生,该试剂盒的灵敏性、可靠性和特异性都较好。