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目的益气养阴解毒方是导师临床配合化疗辅助治疗原发性肝癌的有效验方,其与化疗药物合用能起到明显的增效作用。本研究采用血清药理学的方法,观察益气养阴解毒方的含药血清与化疗药5-FU体外共同作用于肝癌HepG2细胞后,对细胞增殖和凋亡的影响,以及对5-FU诱导的凋亡抑制蛋白survivin的表达和caspase 3活性的影响,从而探讨本益气养阴解毒方与化疗合用治疗肝癌的协同增效作用的相关机制。方法运用血清药理学方法制备大鼠的益气养阴解毒方的含药血清,分为中药含药血清组、化疗药物5-Fu组和中药含药血清+5-Fu组,并设不含药的空白大鼠血清为对照组,分别作用于HepG2细胞,培育24h、48h、72h后,应用MTT检测对细胞增殖的影响;应用流式细胞仪检测各组细胞24h、48h、72h后的凋亡指数;应用western-blot检测各组细胞24h、48h、72h后survivin蛋白的表达变化;应用DEVD-pNA降解法检测各组细胞24h、48h、72h后caspase 3活性变化。结果1、益气养阴解毒复方中药含药血清作用于HepG2细胞24h、48h、72h后,对细胞生长未出现明显的抑制作用(与对照组相比,P>0.05);5-FU组及中药含药血清+5-FU组与HepG2细胞共同培养48h、72h后,HepG2细胞的生长明显受到抑制(与对照组相比,P<0.05);中药含药血清与5-FU共同作用于HepG2细胞抑制作用更明显(与5-FU组相比,P<0.05)。2、中药含药血清组作用24h、48h、72h后流式细胞术检测到HepG2细胞凋亡指数与空白对照组无明显差异(P>0.05),表明中药单独作用不能明显促进HepG2细胞凋亡;5-FU组与HepG2细胞共同培养48h、72h后检测到凋亡指数增多(与对照组相比,P<0.05;P<0.01);中药含药血清+5-FU组48h、72h细胞凋亡指数明显高于5-FU组(P<0.05)。3、各组作用24h、48h、72h后,中药含药血清组HepG2细胞survivin蛋白的表达量无明显变化(与对照组相比,P>0.05):5-FU组HepG2细胞survivin蛋白的表达量逐渐升高(与对照组相比,P<0.05),且具有时间依赖性;而中药含药血清+5-FU组细胞survivin蛋白的升高水平与5-FU组相比明显降低(P<0.05)。4、作用24h、48h、72h后含药血清组HepG2细胞caspase3的活性无明显变化(与对照组相比,P>0.05);作用48h、72h后,5-FU组HepG2细胞caspase3的活性逐渐升高(与对照组相比,P<0.05);而中药含药血清+5-FU组细胞caspase3的活性升高更明显(与5-FU组相比,P<0.05)。结论益气养阴解毒方含药血清可增强5-FU对HepG2细胞的凋亡诱导作用,其作用机制可能是通过降低5-FU诱导的凋亡抑制蛋白survivin的表达,减弱survivin对caspase3活性的抑制实现的,这可能是本方增加肝癌化疗敏感性的重要机制之一。