细胞凋亡(Apoptosis)是生物体内自发发生的细胞生理性的死亡,细胞正常凋亡对维持生物体正常生长发育和维持细胞内环境稳态的作用,细胞异常凋亡能够引发疾病,如癌症和肿瘤等。有报道指出在体外培养的细胞中添加抗氧化剂能够抑制细胞凋亡,茶多酚(Tea polyphenols,TP)是一种天然抗氧化剂,具有多种生物学功能,抗氧化能力比其他抗氧化剂抗氧化能力强很多倍,对体外培养细胞主要用于癌细胞和肿瘤细胞的研究,且对抑制癌细胞和肿瘤细胞的生长作用效果显著,研究表明,TP具有抗癌和抗肿瘤的作用,但是在体细胞培养液中添加TP对体外培养鼠胎儿成纤维细胞凋亡效果的影响尚未见报道。[目的]：本试验主要通过体外培养MEF细胞,用不同浓度的TP培养液处理细胞,研究不同浓度的茶多酚培养液对鼠胎儿成纤维细胞存活率和细胞形态变化的影响,并应用反转录方法检测抗凋亡基因Bcl-2基因、促凋亡Bax基因和促凋亡基因Casase-3从分子水平上检测基因表达量的变化,用来确定天然抗氧化剂茶多酚对鼠胎儿成纤维细胞凋亡效果的影响。[方法]：1.取妊娠12.5天昆明白母鼠,热消化法分离原代细胞进行培养,差速贴壁法纯化细胞,传至第3代,绘制细胞生长曲线,检测细胞活力。2.用含有不同浓度的茶多酚培养液培养细胞,分别培养24h、36h、72h、96h,倒置显微镜观察细胞形态,用MTT法进行细胞存活率的检测,比较添加不同浓度茶多酚培养液对细胞存活率的影响。3.用不同浓度的茶多酚培养液处理细胞,培养72h,分别提取细胞总RNA,进行RT-PCR反应,反转录合成目的基因Bax基因、Bcl-2基因和Caspase-3基因,琼脂糖凝胶电泳对反应产物进行检测,使用软件进行条带灰度值的检测,比较基因的相对表达量。[结论]：通过细胞生长曲线确定了3代细胞适合试验用,不同浓度的茶多酚培养液处理细胞后对鼠胎儿成纤维细胞生存率和形态的影响为：当茶多酚浓度低于100mg/L时,MTT结果为72h时,对细胞促进作用最明显,96h时,细胞生存率低于72h时,可能是细胞正常生长的结果。对鼠胎儿成纤维细胞的生长具有促进作用,并且细胞形态没有发生明显的变化,通过实验结果,当浓度为40mg/mL时促进作用略微明显,高于细胞对照组,但是没有显著差异,当细胞浓度高于100mg/mL时对细胞生长具有抑制作用,从形态学观察出细胞出现调亡现象。通过反转录结果表明在Bax基因、Bcl-2基因和Caspase-3基因的分子途径上没有什么影响,因此,TP各个浓度处理组中基因相对表达量没有显著性差异。证明了适宜浓度TP对MEF细胞生长具有正向的保护作用但是在凋亡基因bcl-2、bax和caspase-3表达途径上无影响,其他机理还有待进一步研究。