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目的:观察双氢青蒿素（DHA）对人类喉部鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖状况、放射治疗敏感性及联合放疗时细胞周期的影响,探讨Stat3信号传导通路在DHA增加细胞放疗敏感性中发挥的作用及可能机制。方法:1细胞毒性试验:MTT实验检测不同浓度（10μM,20μM,40μM,80μM,160μM,320μM）的DHA分别在24小时和48小时对Hep-2细胞的生长抑制作用。2放疗增敏试验:克隆形成实验分析不同电子线放射剂量（0Gy,2Gy,4Gy,6Gy）时20μM DHA对Hep-2细胞的放疗增敏作用。使用单击多靶拟合模型方程计算放射增敏比,评价放疗增敏的效果。3细胞周期检测:流式细胞术检测分析空白对照组、单独20μM DHA治疗组、单独6Gy电子线放射治疗组、20μM DHA联合6Gy电子线放射治疗组对Hep-2细胞细胞周期的影响。4 Western blot检测:Western blot实验分析空白对照组、单独20μM DHA治疗组、单独6Gy电子线放射治疗组、20μM DHA联合6Gy电子线放射治疗组处理Hep-2细胞时,细胞内Stat3、p-Stat3、Cyclin-D1的表达情况。5统计学方法:每个实验均重复3次,实验所得数据均经Excel整理,SPSS17.0统计软件分析,统计方法为单因素方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果:1细胞毒性试验:使用10μM,20μM,40μM,80μM,160μM,320μM的DHA处理Hep-2细胞24小时所对应的增殖抑制率分别为0.171±0.016,0.215±0.019,0.308±0.033,0.523±0.061,0.832±0.028,0.904±0.011,处理48小时时所对应的增殖抑制率分别为0.197±0.010,0.272±0.029,0.382±0.034,0.742±0.030,0.870±0.013,0.934±0.005;不同浓度之间及同一浓度不同时间之间的差异具有统计学意义（均P<0.05）,24小时和48小时对应的IC50分别为58.48μM、41.98μM。2放疗增敏试验:20μM的DHA能够增加Hep-2细胞对放射治疗的敏感性,放疗增敏比SER为2.091±0.232。单纯经2Gy、4Gy、6Gy电子线处理后细胞存活分数SF分别为0.474±0.023、0.109±0.012、0.026±0.009;经20μM的DHA处理后再给予2Gy、4Gy、6Gy电子线照射,所对应的SF分别为0.243±0.020、0.035±0.002、0.006±0.002;DHA联合放疗组比单纯放疗组相比SF均减少（均P<0.05）。单纯放疗时平均致死量D0、准阈剂量Dq、37%致死量D37分别为1.243±0.073、1.283±0.082、2.525±0.024;放疗前使用DHA处理Hep-2细胞时D0、Dq、D37分别为1.013±0.050、0.638±0.115、1.651±0.065,相比单纯放疗组均减少（均P<0.05）。3细胞周期检测:单纯给予20μM的DHA处理Hep-2细胞,G0/G1期阻滞增加（P<0.05）,S期无显著变化（P>0.05）,G2/M期阻滞减少（P<0.05）;放疗前经20μM的DHA处理,相比单纯放疗组,G0/G1期阻滞增加（P<0.05）,S期明显增多（P<0.05）,G2/M期明显减少（P<0.05）。4 Western blot检测:检测细胞内Stat3、p-Stat3、Cyclin-D1的蛋白表达情况,无论是否联合放疗,20μM的DHA处理Hep-2细胞较无药物处理组,Stat3表达量无明显变化（P>0.05）,而p-Stat3（Tyr705）、Cyclin-D1的表达均减少（均P<0.05）。然而结果还提示,无论是否之前经DHA处理,Hep-2细胞在经过6Gy的电子线放射治疗处理后,细胞中p-Stat3表达较无放疗组明显增加（P<0.05）。结论:1 DHA能够抑制Hep-2细胞的生长;DHA对Hep-2细胞的增殖抑制作用具有浓度和时间依赖性,随着DHA药物浓度的增加以及作用时间的延长,对Hep-2细胞的增殖抑制作用越强。2克隆形成实验证实DHA能够增加Hep-2细胞对电子线放射治疗的敏感性;3单独应用DHA可以引起Hep-2细胞发生G0/G1期阻滞,单独应用放射治疗可以导致明显的G2/M阻滞,在放疗前应用DHA不仅增加G0/G1期阻滞,还抑制了放疗导致的G2/M期阻滞。4 DHA可以通过Stat3信号传导通路发挥作用,可以抑制Hep-2细胞内Stat3蛋白在Y705位上的磷酸化,引起其下游的Cyclin-D1蛋白表达下降,从而发挥影响细胞周期的作用。实验结果还提示,电子线照射可以对细胞内的蛋白产生影响,引起Stat3在Y705位上磷酸化增加,即细胞内p-Stat3蛋白水平增加,而且这种增加可以一定程度上被DHA所抑制,进而发挥对Hep-2细胞的放疗增敏作用。