论文部分内容阅读
目的：为保障临床用药安全，对感冒类中成药及相关制剂进行非法添加物的检测方法研究，建立一种集薄层色谱、高效液相色谱、高效液相色谱-质谱联用技术于一体的检测方法，对感冒类中成药及相关制剂进行快速准确筛查，以做到防患于未然，为人们用药安全提供保障，为药品监督作好技术支撑。方法：根据感冒的临床表现，确定可能非法添加的化学成分，采用薄层色谱法初步筛选出可能非法添加的七种抗感冒类化学成分；采用甲醇：水梯度洗脱，流速1mL·min–1，高效液相色谱法同时检测中药感冒药中盐酸吗啉胍、对乙酰氨基酚、咖啡因、非那西丁、氨基比林等五种化学成分的非法添加；以甲醇：乙酸铵为流动相，采用ESI源，多反应监测(MRM),以保留时间及定性离子对之间的相对丰度比定性，以定量离子对峰面积定量，建立UPLC-MS法定性定量检测中药感冒药中对乙酰氨基酚、咖啡因、马来酸氯苯那敏、盐酸伪麻黄碱、双氯芬酸钠、氨基比林、盐酸吗啉胍、醋酸泼尼松的非法添加。结果：1、共筛选了七种薄层色谱条件，最终确定了以下三种薄层色谱条件鉴别盐酸伪麻黄碱、非那西丁、氨基比林、对乙酰氨基酚、双氯芬酸钠、咖啡因、醋酸泼尼松等七种化学成分的薄层色谱方法：盐酸伪麻黄碱的鉴别：硅胶G板，三氯甲烷-甲醇-浓氨（20：5：0.5）为展开剂，茚三酮显色，105℃加热至斑点清晰；非那西丁、氨基比林、对乙酰氨基酚、双氯芬酸钠的鉴别：硅胶GF254板，乙酸乙酯-二氯甲烷-冰乙酸（10：10：0.08）展开，紫外灯254nm下检视；咖啡因、醋酸泼尼松的鉴别：硅胶GF254板，二氯甲烷-乙醚-甲醇-水（15.4：2.4：0.6：0.08）展开，紫外灯254nm下检视。2、高效液相色谱法同时检测感冒类中成药及相关制剂中非法添加的盐酸吗啉胍、对乙酰氨基酚、咖啡因、非那西丁、氨基比林五种化学成分，甲醇：水梯度洗脱，分别在0.2136～1.602mg·L-1、0.2176～2.176mg·L-1、0.2012～2.1020mg·L-1、0.4008～2.0040mg·L-1、0.2040～2.0400mg·L-1范围内呈良好的线性关系，Y＝5.7948X+1.1514，相关系数r=0.9999，加样回收率为95.79%，RSD值为2.10%；Y＝8.464X-0.1752，相关系数r=0.9999，加样回收率为95.74%，RSD值为0.64%；Y＝1.5347X+0.7281，相关系数r=0.9996，加样回收率为97.60%，RSD值为1.49%；Y＝3.6718X+0.2587，相关系数r=0.9999，加样回收率为98.92%，RSD值为0.86%；Y＝7.5854X+0.4811，相关系数r=0.9999，加样回收率为97.70%，RSD值为0.95%。3、UPLC-MS同时检测感冒类中成药及相关制剂中非法添加的对乙酰氨基酚、咖啡因、马来酸氯苯那敏、盐酸伪麻黄碱、双氯芬酸钠、氨基比林、盐酸吗啉胍、醋酸泼尼松八种成分；采用MRM方式监测待测成分，并结合保留时间和相对离子丰度比来定性，八种成分分别在2.176～27.100μg·L-1、1.006～20.120μg·L-1、0.497～9.940μg·L-1、1.035～25.875μg·L-1、0.4915～9.830μg·L-1、0.510～8.160μg·L-1、2.136～10.600μg·L-1、0.492～9.840μg·L-1范围内线性关系良好，线性方程分别为Y=36997X+87979，r=0.9991，其加样回收率为92.43%，RSD值为2.44%；Y=60857X+99131，r=0.9997，其加样回收率为97.75%，RSD值为1.69%；Y=355134X+9955.1，r=0.9998，其加样回收率为89.77%，RSD值为5.14%；Y=317534X+619766，r=0.9997，其加样回收率为87.87%，RSD值为4.57%；Y=5204.4X-31.960，r=0.9997，其加样回收率为88.17%，RSD值为5.03%；Y=15911X+5992.5，r=0.9994，其加样回收率为87.70%，RSD值为4.56%；Y=7429.6X+30941，r=0.9995，其加样回收率为89.31%，RSD值为4.84%；Y=7472.2X+1195.6，r=0.9998，其加样回收率为90.67%，RSD值为2.84%。结论：所建立的三种薄层色谱条件简单、快速、专属性好，可用于基层非法添加的快速筛查；高效液相色谱法同时检测五种成分，可靠、稳定，可用于非法添加的定量测定，UPLC-MS法灵敏度高、专属性强，可作为定性定量检验感冒类中成药中非法添加药物的有效检测方法。