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结肠癌(Colon Cancer)和原发性肝癌(Primary Liver Cancer)是目前最常见的恶性肿瘤,发病率逐年增加。研究发现大豆及其发酵制品具有抑制肿瘤的功效,经过发酵后大豆对肿瘤的抑制效果显著增加。本课题以人结肠癌HT-29细胞、Caco-2细胞和人肝癌HepG2细胞为模型,研究干酪乳杆菌16(Lactobacillus casei 16)发酵豆乳对肿瘤细胞增殖的影响以及L.casei 16发酵对豆乳组分的影响,并探讨发酵豆乳对HT-29细胞凋亡相关蛋白表达的影响。首先,豆乳经过L.casei 16发酵后,用亚甲基蓝法研究了发酵豆乳、普通豆乳水提物和80%醇提物对人结肠癌HT-29细胞、Caco-2细胞和肝癌HepG2细胞增殖的影响。结果表明,发酵豆乳、普通豆乳醇提物和水提物对三种细胞增殖的抑制率与浓度、时间呈正相关。当L.casei 16发酵豆乳醇提物、水提物浓度为500μg/mL作用HT-29、Caco-2和HepG2细胞72h时,其抑制率分别达到28.08±0.07%、34.31±1.47%、34.35±0.43%和31.23±1.08%、、32.40±0.99%、53.79±0.82%,均显著高于普通豆乳(p<0.05)。同时研究发现提取物对HepG2细胞抑制率最高,且发酵豆乳水提物对HT-29细胞和HepG2细胞的抑制率显著高于醇提物(p<0.05),但对Caco-2细胞无显著差异。其次,用高效液相色谱法研究普通豆乳、发酵豆乳醇提物中异黄酮含量的变化。结果表明,普通豆乳经过L.casei 16发酵后,糖苷型异黄酮大豆苷、黄豆黄素和染料木苷分别降低了91.21%、94.67%和89.42%(p<0.05),而苷元型异黄酮大豆苷元、黄豆黄素苷元和染料木素含量提高了11.67、4.04和17.0倍(p<0.05)。苷元型异黄酮含量的提高是发酵豆乳醇提物抑制肿瘤增殖效果提高的原因。再次采用Tricine-SDS-PAGE和高效液相色谱法研究普通豆乳、发酵豆乳水提物中蛋白和氨基酸组分含量的变化。结果表明:豆乳经过发酵后,在L.casei 16自身产生的蛋白酶作用下,大分子的蛋白质转化为小分子氨基酸,但氨基酸的种类未变。其中除天门冬氨酸含量有所下降外,其它氨基酸含量均提高,尤其苯丙氨酸变化最为显著,提高了5.52倍。推测氨基酸含量的变化是发酵豆乳水提物抑制肿瘤增殖效果提高的原因。最后采用免疫印迹法研究普通豆乳、发酵豆乳水提物作用HT-29细胞后相关凋亡蛋白表达量的变化,以初步探讨豆乳抑制肿瘤增殖的机制。结果表明,普通豆乳和发酵豆乳均能通过上调HT-29细胞内Bax,下调Bcl-2和PCNA的表达量来抑制HT-29细胞的增殖。发酵豆乳对HT-29细胞中Bax/Bcl-2的调控显著高于普通豆乳(p<0.05),说明发酵豆乳可能通过线粒体凋亡通路而提高对HT-29细胞的抑制效果。综上,豆乳经过L.casei 16发酵,提高了发酵豆乳中苷元型异黄酮的含量和氨基酸含量,而提高了豆乳对人结肠癌HT-29细胞、Caco-2细胞和肝癌HepG2的抑制效果。