辣椒提取物的分离炖化及生物活性研究

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辣椒碱(Capsaicin),又称辣椒素是辣椒果实中的辣味成分,具有多种生理作用,广泛的应用于工农业、食品、医药、军事等方面,有“软黄金”之誉。我国是辣椒种植大国,具有丰富的资源,但对于辣椒碱的研究有待深入,尤其对它抗氧化方面的研究还未曾报道过。本论文主要研究辣椒提取物中辣椒碱提取、纯化,辣椒碱粗提物的抗氧化作用和抑菌作用。研究结果如下:   1.采用乙醇、甲醇、丙酮等有机溶剂提取辣椒碱,运用紫外可见分过光度计测定辣椒碱提取率。通过正交试验得出辣椒碱的最佳提取工艺条件:采用70%的乙醇作为提取溶剂,料液比为1:4,提取温度为55℃,提取时间采用4h,辣椒的粒度为40目,辣椒碱得率为0.345%。   2.通过筛选,选用丙酮:氯仿=1:4、丙酮:氯仿=1:6、石油醚:丙酮=2:1等六种混合溶剂作为辣椒碱薄层层析展开剂,得出辣椒碱与其他组分分离效果最好的溶剂系统为丙酮:氯仿=1:6,其辣椒碱的Rf值=0.76,而其他组分的Rf值=0.33。   3.柱层析纯化法所得辣椒碱含量40.0%,活性炭脱色吸附法所得辣椒碱含量为29.8%,两种纯化方法所得辣椒碱经TLC分析,辣椒碱的Rf值相同(Rf=0.80)。   4.采用分光光度法测定辣椒碱的还原力能力、清除DPPH·、·OH和·O2-的能力。结果表明0.48mg/mL辣椒碱的还原力是1.26mg/mL抗坏血酸的3.3倍,当辣椒碱浓度>0.32mg/mL还原力迅速增强;辣椒碱浓度从0.08mg/mL增加到0.48mg/mL时,其对DPPH·的清除率增加了1.5倍、对·OH的清除率增加了7A倍、对·O2-的清除率增加了2.1倍;0.48mg/mL的辣椒碱比1.26mg/mL的抗坏血酸对DPPH·的清除率低3.01%、对·OH的清除率低62.31%、对·O2-的清除率低43.81%。作用时间相同时,2.4mg/mL的抗坏血酸与9.17mg/mL的辣椒碱对菜籽油的抗氧化效果相似。   6.采用滤纸片法研究辣椒碱的抗菌作用,结果表明辣椒碱具有广谱抑菌作用,0.029g/mL的辣椒碱对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、啤酒酵母、葡萄酒酵母、青霉、绿霉的抑菌直径分别为:8mm、5mm、7mm、6mm、4mm、6mm、2mm,对黑曲霉没有抑制作用;可见辣椒碱对细菌的抑菌效果为:金黄色葡萄球菌>沙门氏菌>大肠杆菌;对酵母菌的抑制效果为:啤酒酵母>葡萄酒酵母:对霉菌的抑制效果为:青霉>绿霉。   7.采用两杯稀释法测定辣椒碱的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),结果表明辣椒碱对细菌既有较强的抑菌作用又有杀菌作用,对霉菌和酵母菌没有杀菌作用,只能起到抑制的作用。辣椒碱对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、啤酒酵母、葡萄酒酵母、青霉、绿霉的最小抑菌浓度为:0.45mg/mL、7.18 mg/mL、14.35 mg/mL、7.18 mg/mL、28.7mg/mL、7.18 mg/mL、14.35 mg/mL;对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌的最小杀菌浓度为:28.7 mg/mL、14.35 mg/mL、14.35 mg/mL。   8.通过在豆干中防腐作用的研究,结果表明:用4.1mg/mL,的辣椒碱和1‰的山梨酸钾处理的豆干,保温24h后,测的菌落总数前者比后者少23cfu/g;保温48h后,前者的菌落总数比后者多15cfu/g,可见保温时间≤48h,4.1mg/mL的辣椒碱的防腐效果比1‰的山梨酸钾好。28.7mg/mL的辣椒碱添加量从0.03%增加到0.14%时,其抑菌率增加了48.5%;28.7mg/mL,辣椒碱,添加量为0.14%,在中性环境中抑菌效果达到最好,豆干菌落总数为164cfu/g,达到最低;28.7mg/mL,辣椒碱,添加量为0.14%,处理温度从30℃升高到120℃,菌落总数增加了92cfu/g,可见辣椒碱的防腐作用具有较宽的温度范围。
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