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目的本课题旨在观察头针对结扎左冠脉前降支缺血再灌注(MIRI)心律失常大鼠心电图、心肌缺血和梗塞范围、心肌超微结构及LDH的影响,探讨头针抗MIRI损伤的保护作用；以SOD、MDA、Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase及一氧化氮合酶、一氧化氮为观测指标,研究头针抗心律失常效应的分子生物学机制；通过检测中枢下丘脑室旁核和延髓头端腹外侧区nNOS表达、外周交感神经放电、去甲肾上腺素含量及心肌p,-AR蛋白表达水平的变化,探讨头针对MIRI心律失常大鼠交感系统通路的调节作用,为针灸临床提供现代科学依据。方法健康Wistar大鼠,体重235±18克,雌雄各半,按随机分组原则将90只大鼠分成五组：A、空白对照组；B、假手术组(穿线不结扎)；C、模型组(穿线结扎后复灌)；D、头针组；E、西药对照组(维拉帕米组)。五组采用标准Ⅱ导记录心电图(ECG),所有信号均输入BL-420E+生物机能实验系统。取腹主动脉血标本,监测NO、SOD及MDA含量。随后取缺血区心肌标本,分析心肌缺血、梗塞范围和超微结构变化,检测心肌Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase以及总一氧化氮合酶(TNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与结构型一氧化氮合酶(cNOS)的生物活性。B、C及D组用BL-420E+生物机能实验系统记录交感神经放电情况,采用Elisa方法检测血浆NE含量,采用Western blot检测缺血区心肌β1-AR蛋白表达的变化。实验结束后进行脑固定并取材、切片,通过免疫组化方法检测下丘脑室旁核和延髓头端腹外侧区nNOS表达。结果1模型组大鼠ECG表现多为室性早搏(VP)、室性心动过速(VT)。较空白对照组均有显著性差异(P<0.01)。头针组,其ECG显著改善,心律失常发生率明显降低,与模型组比较有显著差异(P<0.01)；头针组对ECG的改善作用与西药对照组比较,无显著性差异(P>0.05)。2头针组大鼠心肌缺血区和梗塞区范围较模型组明显缩小(P<0.05)。头针组与西药对照组相比,心肌缺血区和梗塞区范围没有显著性差异(P>0.05)。3模型组大鼠心肌结构较正常组损害严重,心肌细胞明显水肿,肌原纤维排列紊乱,明暗带模糊不清；线粒体明显肿胀,有空泡变性,嵴突稀疏,排列紊乱；部分细胞核周水肿、核固缩,常染色质减少,异染色质增多。头针组心肌超微结构较模型组破坏明显减轻。部分肌原纤维排列略紊乱,肌丝结构模糊；部分线粒体轻度肿胀。4模型组较空白对照组LDH活性明显升高(P<0.01)。头针组LDH活性较模型组明显降低(P<0.01),头针组和西药对照组的LDH活性没有显著性差异(P>0.05)。5模型组与空白对照组比较,血浆SOD活性降低(P<0.01),MDA浓度显著升高(P<0.01)。头针组SOD活性较模型组明显增高(P<0.05),MDA浓度较模型组显著下降(P<0.01,)。头针组和西药对照组各值差异不明显(P>0.05)。6模型组Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性较空白对照组明显降低(P<0.01)。头针组两种ATP酶活性较模型组增高(P<0.01),但头针组和西药对照组两种ATP酶活性无显著性差别(P>0.05)。7模型组较空白对照组TNOS和cNOS的活性明显降低(P<0.01),iNOS的活性明显升高(P<0.01)。头针组TNOS和cNOS的活性较模型组明显升高(P<0.01),iNOS的活性明显降低(P<0.05),头针组和西药对照组三种NOS活性没有显著性差异(P>0.05)模型组较空白对照组NO含量明显降低(P<0.01)。头针组NO含量较模型组明显升高(P<0.01),头针组和西药对照组的NO含量没有显著性差异(P>0.05)。8模型组较假手术组下丘脑室旁核nNOS灰度值显著降低(P<0.01),提示模型组下丘脑室旁核nNOS神经元阳性表达增多。头针组nNOS灰度值较模型组明显升高(P<0.01),提示头针组下丘脑室旁核nNOS表达降低。9模型组较假手术组延髓头端腹外侧区nNOS灰度值显著升高(P<0.01),提示模型组延髓头端腹外侧区nNOS神经元阳性表达减少。头针组nNOS灰度值较模型组明显降低(P<0.05),提示头针组延髓头端腹外侧区nNOS表达升高。10模型组再灌后交感神经放电活动较假手术组明显升高(P<0.01)。头针组交感神经放电活动较模型组明显降低(P<0.05)。11模型组较假手术组血浆NE浓度、心肌β1-AR蛋白表达明显升高(P<0.01)。头针组模型组血浆NE浓度、心肌β1-AR蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论本实验结果显示,结扎大鼠左冠状动脉前降支造成缺血后复灌可诱发实验性大鼠的室性心律失常,头针使心律失常的发生率显著下降,心肌缺血和梗塞范围缩小,心肌超微结构损伤减轻、血浆LDH明显降低,表明头针有明显的保护心肌细胞、抗心律失常作用。头针能有效升高再灌注性心律失常大鼠血浆SOD活性,降低MDA,增加NO含量,提高心肌细胞TNOS.cNOS和Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase的活性,表明头针可对抗氧自由基损伤,减轻细胞内Ca2超载及调整NOS的生物活性和NO的含量,从而抑制MIRI,使心肌细胞电活动趋于稳定,防止心律失常的发生。这可能是头针抗再灌注性心律失常作用的生物学机制。头针使再灌注性心律失常大鼠下丘脑室旁核nNOS神经元阳性表达降低,延髓头端腹外侧区nNOS表达升高,交感神经放电频率明显降低,血浆NE浓度明显降低,心肌β1-AR蛋白表达降低,头针可通过中枢及外周相关交感系统通路,发挥抗心律失常作用。