论文部分内容阅读
目的:子痫前期(Preeclampsia, PE)属于妊娠期高血压疾病，是一种妊娠期特有的疾病，严重威胁着母婴的安全与健康，尽管近年来新技术、新方法、新概念不断地被引入PE的临床与基础研究，但这种疾病的发病机制仍不清除。目前，越来越多的证据表明PE的发生可能与胎盘的缺血、缺氧有关。前人研究证明HIF-1α与胎盘的缺血缺氧相关。HIF-1α/15-LO/15-HETE信号通路与缺氧密切相关，因此，我们拟通过实验观察HIF-1α/15-LO/15-HETE这一信号通路是否有可能参与PE患者胎盘内皮增生，并阐明其分子机制。 方法:研究采用免疫组化方法确定HIF-1α与15-LO在正常胎盘和PE胎盘中的表达和定位。在给予脐静脉内皮细胞(umbilical vein endothelial cells，HUVECs)15-LO抑制剂NDGA之后，我们通过高效液相方法检测缺氧对于15-HETE含量生成的调节作用。RT-PCR及Western-Blot技术用来确认缺氧对15-LO的mRNA及蛋白表达的影响。此外，还检测了HUVECs迁移及管腔形成，并对HUVECs的BrdU掺入水平以及细胞周期进行检测，以观察15-HETE对缺氧诱导的脐静脉血管重构中的作用。 结果:除了验证HIF-1α在PE患者的胎盘中呈现高表达，我们首次发现PE患者胎盘和脐带中15-HETE的血清浓度均显著高于正常孕妇。体外实验表明，随着缺氧时间的增加，15-LO的表达明显增强。15-HETE可导致缺氧诱导的HUVECs发生细胞迁移及血管新生。另外，实验还发现15-HETE调节脐静脉内皮细胞细胞周期进程从DNA合成前期向DNA合成期及有丝分裂期跃迁，还能够增强细胞核内的纺锤体形成，而15-LO抑制剂NDGA抑制这些作用。 结论:HIF-1α/15-LO在PE患者胎盘及脐静脉内皮细胞中表达明显上调，PE患者胎盘、静脉血及脐带血中15-HETE的浓度显著高于正常孕妇。15-HETE明显促进脐静脉内皮细胞的合成和分裂，由此证实了HIF-1α/15-LO/15-HETE这一通路与PE的病理密切相关。这些结论为未来治疗PE疾病提供了关键切入点。