肺癌是目前工业国家中最常见癌症之一,其发生率正在逐年提高。在癌症发展恶化的过程中,癌细胞的增殖和迁移能力起到了极其关键的作用。G蛋白偶联受体4,简称GPR4,是一种广泛表达的G蛋白偶联受体。有研究发现,GPR4可以作为脂类分子SPC、LPC和质子的受体引发细胞内的信号通路。还有研究发现在癌细胞中GPR4的过表达能促进细胞的恶性转变,提高细胞在低血清水平下增殖的能力。GPR4的表达与癌症病人的症状发展和存活时间具有密切的联系,充分了解这一受体的功能对于我们认识癌症,帮助癌症患者都具有潜在的重要价值。　　 肿瘤的迁移是一个多信号调控的复杂过程,许多细胞因子如生长因子、趋化因子等都参与这一复杂的信号网络。趋化因子RANTES,系统命名CCL5,最初作为免疫细胞分泌调控分子被人们发现,对T淋巴细胞和单核细胞的活化、增殖、运输和靶向定位都具有重要的作用。近年来,有报道发现RANTES在体液中的表达水平与癌症病人的存活率具有相关关系,进而又有研究发现RANTES能作用于癌细胞,促进癌细胞对胞外基质环境的降解从而提高癌细胞的迁移能力。　　 本文采用肺癌细胞A549作为研究对象,通过在该细胞系中过表达GPR4发现它能促进细胞的迁移,此外GPR4分泌的条件培养基也具有促进A549细胞迁移的作用。这说明GPR4对细胞迁移的促进在一定程度上是通过向胞外环境分泌某种促进物质而引起的。从这一角度着手,我们发现GPR4能在A549细胞中促进趋化因子RANTES的表达和分泌。这可能从一个角度解释了GPR4对细胞的促迁移作用。　　 为了深入探究GPR4对RANTES的表达调控机理,我们首先用GPR4的已知配体LPC、SPC和质子对细胞进行处理,发现上述刺激因素都不会明显影响GPR4对RANTES的上调作用。接着我们用百日咳毒素(PTX)处理GPR4高表达的A549细胞,发现GPR4对RANTES的表达促进作用被抑制,而G12/13和Gq的抑制剂却没有类似的效果,这说明Gi蛋白参与介导了这一过程。此外,我们对RANTES的启动子片段进行的荧光报告基因分析,发现转录因子NF-κB参与了GPR4对RANTES的调控,用NF-κB的抑制剂PDTC进行处理也有相应的抑制效果。之后我们发现NF-κB上游的PI3K/Akt通路在GPR4高表达的情况下得到激活,同时这一现象又可以被PTX所阻断,而用PI3K通路的抑制剂处理同样能抑制GPR4对RANTES的表达促进作用。因此,我们的研究首次发现GPR4可以通过Gαi-PI3K/Akt-NF-κB信号通路促进RANTES的表达,分泌到胞外的RANTES可能以自分泌的方式作用于其自身,进而促进细胞的迁移。