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目的:
研究力竭状态对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化易损斑块的影响及抗阻运动的干预作用。
方法:
1.动物分组与模型建立
30只ApoE-/-小鼠用随机数表法随机分3组,对照组(C组)、力竭组(E组)、抗阻+力竭组(R组),全程高脂喂养,高脂饮食配方为:主要成分0.15%胆固醇、21%脂肪和15.5%蛋白质。8周龄ApoE-/-小鼠适应性喂养1周后,全部行颈总动脉套管术,术后R组先进行8周抗阻运动,其余两组正常活动,8周抗阻运动结束后E组和R组均进行2周力竭游泳运动。
1.1 抗阻运动
ApoE-/-小鼠颈动脉套管术后1周开始进行7天渐进性递增负荷的爬梯训练。爬梯高为1.1米,间隔为2厘米,倾斜角度为85°。第一周为适应性训练,以不负重起始,每天以10%体重的负荷递增(负荷使用橡皮泥绑在小鼠尾巴根部),终负荷为体重的70%,每天进行两组,每组重复3次,组内休息1分钟,组间休息2分钟,5天/周,持续8周。
1.2 力竭游泳
力竭游泳采用水迷宫作为小鼠游泳槽,内壁光滑,水温控制在32±2℃之间,室温控制在21-23℃,相对湿度40%-60%,水深为小鼠(身长+尾长)×1.5倍,小鼠尾部负重2%的体重负荷。正式实验前一天进行一次热身运动以适应游泳。力竭标准:小鼠连续3次沉入水底,每次超过10秒,不能自主浮上水面;同时观察小鼠身体状况,当出现协调运动丧失,放在平面上无法完成翻正反射时即从水中捞出。每次游泳运动结束后均擦除水分,并使用吹风机吹干皮毛。每次游泳至力竭标准。力竭游泳运动共进行2周,1次/天,于最后一次力竭游泳运动后即刻取材。
2.取材及观察指标
10周后处死全部小鼠取颈总动脉,首先石蜡切片,苏木素-伊红(HE)染色观察斑块面积,同时Masson染色观察胶原成分;接着冰冻切片,油红O染色观察脂质沉积,再者用免疫组化法检测巨噬细胞、平滑肌细胞在颈动脉斑块局部的表达。最后分别计算各组斑块的易损指数。各组小鼠均取血清ELISA法分别检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)浓度。
结果:
1.初步成功构建力竭状态诱导动脉粥样硬化易损斑块破裂的小鼠模型
2.力竭状态和抗阻运动对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化易损斑块的影响:
(1)力竭状态和抗阻运动对斑块面积的影响:E组斑块面积明显大于C组和R组,R组最小,P<0.05(P=0.000)。
(2)力竭状态和抗阻运动对纤维帽厚度的影响:R组纤维帽厚度大于E组和C组,E组最小,P<0.05(P=0.045)。
(3)力竭状态和抗阻运动对脂质沉积的影响:E组占比大于C组和R组,R组最小,P<0.05(P=0.000)。
(4)力竭状态和抗阻运动对胶原成分的影响:E组占比小于C组和R组,R组最大,P<0.05(P=0.000)。
(5)力竭状态和抗阻运动对颈动脉斑块局部巨噬细胞和血管平滑肌细胞表达的影响:巨噬细胞在颈总动脉斑块局部表达中,E组大于C组和R组,C组表达最少,P<0.05(P=0.000);E组颈总动脉斑块局部平滑肌细胞表达少于C组和R组,R组表达最多,P<0.05(P=0.000)。
(6)力竭状态和抗阻运动对易损指数的影响:易损指数E组明显高于C组和R组,R组最小,P<0.05(P=0.000)。
3.力竭状态和抗阻运动对血脂水平(TG、TC、LDL-C、HDL-C)的影响:
C组总体血脂水平高于E组和R组,R组最低,差异有统计学意义(P<0.05)。
(1)TC:C组(16.91±0.25),E组(16.97±0.22),R组(15.69±0.63),P<0.05(P=0.000)。
(2)TG:C组(1.14±0.47),E组(1.15±0.44),R组(0.89±0.40),P<0.05(P=0.028)。
(3)LDL-C:C组(18.94±2.64),E组(18.91±2.56),R组(16.43±3.08),P<0.05(p=0.045)。
(4)HDL-C:C组(5.54±0.53),E组(5.47±0.48),R组(5.99±0.56),P<0.05(P=0.038)。
结论:
力竭状态可诱导易损斑块破裂,抗阻运动作为一种保护性干预,提早实施能够达到稳定斑块的作用,其机制可能与减少巨噬细胞浸润、抑制平滑肌凋亡和调节血脂水平有关。
研究力竭状态对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化易损斑块的影响及抗阻运动的干预作用。
方法:
1.动物分组与模型建立
30只ApoE-/-小鼠用随机数表法随机分3组,对照组(C组)、力竭组(E组)、抗阻+力竭组(R组),全程高脂喂养,高脂饮食配方为:主要成分0.15%胆固醇、21%脂肪和15.5%蛋白质。8周龄ApoE-/-小鼠适应性喂养1周后,全部行颈总动脉套管术,术后R组先进行8周抗阻运动,其余两组正常活动,8周抗阻运动结束后E组和R组均进行2周力竭游泳运动。
1.1 抗阻运动
ApoE-/-小鼠颈动脉套管术后1周开始进行7天渐进性递增负荷的爬梯训练。爬梯高为1.1米,间隔为2厘米,倾斜角度为85°。第一周为适应性训练,以不负重起始,每天以10%体重的负荷递增(负荷使用橡皮泥绑在小鼠尾巴根部),终负荷为体重的70%,每天进行两组,每组重复3次,组内休息1分钟,组间休息2分钟,5天/周,持续8周。
1.2 力竭游泳
力竭游泳采用水迷宫作为小鼠游泳槽,内壁光滑,水温控制在32±2℃之间,室温控制在21-23℃,相对湿度40%-60%,水深为小鼠(身长+尾长)×1.5倍,小鼠尾部负重2%的体重负荷。正式实验前一天进行一次热身运动以适应游泳。力竭标准:小鼠连续3次沉入水底,每次超过10秒,不能自主浮上水面;同时观察小鼠身体状况,当出现协调运动丧失,放在平面上无法完成翻正反射时即从水中捞出。每次游泳运动结束后均擦除水分,并使用吹风机吹干皮毛。每次游泳至力竭标准。力竭游泳运动共进行2周,1次/天,于最后一次力竭游泳运动后即刻取材。
2.取材及观察指标
10周后处死全部小鼠取颈总动脉,首先石蜡切片,苏木素-伊红(HE)染色观察斑块面积,同时Masson染色观察胶原成分;接着冰冻切片,油红O染色观察脂质沉积,再者用免疫组化法检测巨噬细胞、平滑肌细胞在颈动脉斑块局部的表达。最后分别计算各组斑块的易损指数。各组小鼠均取血清ELISA法分别检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)浓度。
结果:
1.初步成功构建力竭状态诱导动脉粥样硬化易损斑块破裂的小鼠模型
2.力竭状态和抗阻运动对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化易损斑块的影响:
(1)力竭状态和抗阻运动对斑块面积的影响:E组斑块面积明显大于C组和R组,R组最小,P<0.05(P=0.000)。
(2)力竭状态和抗阻运动对纤维帽厚度的影响:R组纤维帽厚度大于E组和C组,E组最小,P<0.05(P=0.045)。
(3)力竭状态和抗阻运动对脂质沉积的影响:E组占比大于C组和R组,R组最小,P<0.05(P=0.000)。
(4)力竭状态和抗阻运动对胶原成分的影响:E组占比小于C组和R组,R组最大,P<0.05(P=0.000)。
(5)力竭状态和抗阻运动对颈动脉斑块局部巨噬细胞和血管平滑肌细胞表达的影响:巨噬细胞在颈总动脉斑块局部表达中,E组大于C组和R组,C组表达最少,P<0.05(P=0.000);E组颈总动脉斑块局部平滑肌细胞表达少于C组和R组,R组表达最多,P<0.05(P=0.000)。
(6)力竭状态和抗阻运动对易损指数的影响:易损指数E组明显高于C组和R组,R组最小,P<0.05(P=0.000)。
3.力竭状态和抗阻运动对血脂水平(TG、TC、LDL-C、HDL-C)的影响:
C组总体血脂水平高于E组和R组,R组最低,差异有统计学意义(P<0.05)。
(1)TC:C组(16.91±0.25),E组(16.97±0.22),R组(15.69±0.63),P<0.05(P=0.000)。
(2)TG:C组(1.14±0.47),E组(1.15±0.44),R组(0.89±0.40),P<0.05(P=0.028)。
(3)LDL-C:C组(18.94±2.64),E组(18.91±2.56),R组(16.43±3.08),P<0.05(p=0.045)。
(4)HDL-C:C组(5.54±0.53),E组(5.47±0.48),R组(5.99±0.56),P<0.05(P=0.038)。
结论:
力竭状态可诱导易损斑块破裂,抗阻运动作为一种保护性干预,提早实施能够达到稳定斑块的作用,其机制可能与减少巨噬细胞浸润、抑制平滑肌凋亡和调节血脂水平有关。