新疆焮麻(Urtica cannabina L)内生菌的分离及棉花黄萎病等病菌拮抗菌的筛选与鉴定

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为探索分离焮麻(Urtica cannabina L .)内生菌的最佳方法,并分离获得焮麻内生菌,探讨ERIC-PCR的引物在植物内生细菌分型应用中的优化及其与AP-PCR的结合在植物内生菌分子分型中的应用价值,筛选、获得对经济作物和农作物致病真菌具有拮抗能力的内生细菌,本研究首先采用碾碎法与剖开法对焮麻的内生菌进行分离,根据培养基上菌斑出现的数量确定碾碎法为适合分离焮麻的内生菌的方法。用碾碎法对焮麻的内生菌进行分离,分离获得12株内生细菌,2株内生真菌,依据形态学与生理生化特性,同时对比AP-PCR和ERIC- PCR图谱,对所分离内生细菌进行初步的分类鉴定,结果表明所筛选的12株内生细菌中2株为奈氏菌属,1株为葡萄球菌属,1株为链球菌属,3株为芽孢杆菌属,2株为短杆菌属,3株为肠杆菌属,并对ERIC-PCR引物进行了优化,优化引物后的ERIC-PCR条带稳定、丰富、清晰,AP-PCR与ERIC-PCR结合使用分型型效果明显增强。通过琼脂扩散法进行了研究,结果表明,XJUL-6对棉花黄萎病具有较强拮抗能力;XJUL-12对西瓜枯萎病具有拮抗能力;XJUL-8对黄瓜枯萎病具有拮抗能力,他们的抑菌圈分别达28mm,23mm,17mm。依据筛选、获得的内生菌的形态特征、生理生化检测、16SrDNA、G+Cmo1%,将XJUL-6鉴定为蜡状芽孢杆菌,将XJUL-12鉴定为枯草芽孢杆菌,将XJUL-8鉴定为苏云金杆菌。同时对XJUL-6的生物学特性进行初步研究,结果表明,36℃~38℃为其最适生长温度,pH6~8为其最适生长pH值,2%NaCl浓度为XJUL-6的最适生长NaCl浓度。
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