香菇菌棒腐烂病相关木霉鉴定与发生规律初步研究

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我国是世界上香菇生产第一大国,香菇产业在食用菌产业中占有重要地位,我国各地均有栽培。香菇菌棒腐烂病在湖北随州发生严重,与一般菌丝阶段木霉(Trichoderma)污染不同,该病害主要发生在秋栽香菇采收第一潮菇之后,随着翌年春季气温回升,呈爆发式发生,给香菇产业带来了严重的损失。本论文报告了在湖北随州系统调查香菇菌棒腐烂病的研究结果,同时在河南泌阳、西峡、三门峡,福建屏南、闽清、尤溪,浙江丽水、景宁、庆元等香菇产地采集香菇菌棒腐烂病样本。从133份样本中共分离到了58株分离物,结合形态学、ITS及tef1-α鉴定出6种木霉;研究比较了部分木霉菌株的培养特性和对香菇菌丝体的影响;系统研究了石膏含量、刺孔次数、补水时间和补水方式、温度对病害发生的影响;研究了6种木霉对香菇不同菌株转色期间的接种感染能力。在58株分离物中,38株为哈茨木霉(T.harzianum),4株为绿色木霉(T.viride),6株为深绿木霉(T.atroviride),4株为长枝木霉(T.longibrachiatum),3株为侧耳木霉(T.pleuroticola),3株为矩孢木霉(T.oblongisporum),其中哈茨木霉占绝对优势,分布于4个省份的香菇种植区。不同木霉菌株在不同温度和p H下培养特性亦存在差异,大多数木霉菌株最适生长温度为25℃,个别菌株为30℃;24个供试木霉菌株中有18个在35℃时仍可生长。在不同培养基质上香菇菌丝对木霉抗性不同。在CYM培养基上,哈茨木霉(T12、T28、T21、T38、T48)、绿色木霉(T25、T52、T55)、深绿木霉(T29、T24)、侧耳木霉(T22、T35、T39)、长枝木霉(T33)和矩孢木霉(T37)对香菇菌丝的抑制率各不相同。其中哈茨木霉、侧耳木霉、绿色木霉菌株对香菇菌丝的抑制作用较强在63%-94%之间,长枝木霉抑制作用最小,仅有29%,两株深绿木霉的表现差异大,抑制率分别为73%(T29)和50%(T24)。而在木屑培养基上对峙培养时,香菇(秋7)菌丝对6种木霉均具有很强的抗性,两者间形成明显的拮抗线,木霉菌丝不能覆盖香菇菌丝而继续生长,且在香菇栽培袋转色期,11株木霉与4个香菇菌株对峙培养的44种组合中只有6种组合表现发病症状,表明在正常栽培条件下木霉对香菇菌棒具有较弱的致病力。研究表明,培养基中哈茨木霉(T36)发酵液添加量为30%时,对香菇菌丝没有抑制作用,而相同处理的矩孢木霉(T37)发酵液对香菇菌丝的抑制率达60%以上。在含有矩孢木霉发酵液的培养基上培养香菇菌丝,扫描电子显微镜下观察到香菇菌丝变粗、异常扭结、细胞壁破裂和菌丝干瘪等现象,表明木霉可以通过分泌次级代谢产物抑制香菇菌丝的生长。试验表明,香菇菌棒腐烂病发生与栽培袋石膏含量、刺孔次数、补水时间及方式没有明显的相关性,而与菌丝培养温度呈正相关。研究表明,以木屑培养基培养的香菇菌丝可以耐受短时高温胁迫(如37℃6h),随着胁迫时间延长,香菇菌丝抗逆性急剧下降。与对照相比,高温胁迫后活力恢复的香菇菌丝生长速度普遍快于对照处理。研究结果表明,高温可导致香菇菌丝的抗逆性迅速下降,超过一定阈值会使香菇菌丝死亡。在香菇菌丝未致死的条件下,这种高温胁迫是可逆的,在适宜条件下会恢复活力,甚至增强。根据气候特点合理安排接种时间,做好养菌期间的卫生及通风降温工作,是减少香菇菌棒腐烂病的重要措施。
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