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目的DOK1/2/5是酪氨酸激酶下游蛋白(downstream of tyrosine kinase,DOK)家族的成员,它们在肿瘤发生发展中起着重要作用。本研究拟探索DOK1/2/5在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)、慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)和骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)中的表达、甲基化水平及临床意义。方法应用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)检测DOK1/2/5的表达水平。应用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,RQ-MSP)及亚硫酸氢盐测序(bisulfite sequencing PCR,BSP)方法检测DOK1/2/5甲基化水平及密度。应用去甲基化药物地西他滨处理白血病细胞株THP-1和K562进一步验证DOK1/2/5甲基化对表达的调控与影响。结果AML患者中DOK1/2/5表达水平较正常对照显著下调(P=0.041、P=0.016、和P<0.001)。DOK1和DOK2高、低表达在AML患者临床参数中无显著差异(P>0.05)。DOK5在AML男性患者中表达水平较女性患者高(P=0.031)。生存分析显示,DOK1低表达的全部AML和非M3型AML患者总体生存时间显著缩短(P=0.006和P=0.015)。同时,在全部AML和非M3型AML患者中,DOK1低表达患者无白血病生存时间也明显短于高表达患者(P=0.018和P=0.009)。化疗后随访AML患者发现,DOK2低表达组的完全缓解率明显低于高表达患者(P=0.046)。而且,DOK2低表达的全部AML和非M3型AML患者总体生存时间(P<0.001和P<0.001)和无白血病生存时间(P=0.022和P=0.006)也显著缩短。多因素分析进一步表明,DOK1和DOK2低表达在AML患者中是不良预后的独立危险因素。DOK5在AML患者中表达水平较对照组低,但DOK5低表达与患者的总体生存和无白血病生存时间无关(P>0.05)。甲基化检测发现DOK1和DOK2在AML患者中甲基化水平较对照组显著升高(P=0.047和P=0.048),而DOK5甲基化水平与对照组无显著差异(P=0.301)。DOK1和DOK2高、低甲基化在AML患者的基础实验室参数和核型、核型分组、基因突变等参数中均无统计学差异(P>0.05)。生存分析发现,DOK1高甲基化的全部AML患者总体生存和无白血病生存时间明显短于低甲基化患者(P=0.026和P=0.043),而在非M3型AML患者中DOK1高、低甲基化不影响患者总体生存和无白血病生存时间(P>0.05)。DOK2高甲基化的全部AML和非M3型AML患者总体生存时间较低甲基化患者显著缩短(P=0.005和P=0.016),但DOK2高甲基化不影响患者无白血病生存时间(P>0.05)。DOK2高甲基化的AML患者完全缓解率也显著低于低甲基化患者(P=0.011)。多因素分析显示DOK1和DOK2高甲基化是AML患者预后不良独立因素。相关性分析发现,在AML患者中DOK1和DOK2基因表达水平及甲基化水平呈负相关(R=-0.341,P=0.001和R=-0.252,P=0.011),然而DOK5基因甲基化水平与表达水平并无相关性(R=0.049,P=0.791)。去甲基化药物处理白血病细胞株THP-1后发现,DOK1和DOK2表达水平均上调,同时甲基化水平和密度均显著下降。CML患者中DOK1/2/5表达水平与对照组相比无显著统计学差异(P=0.704、P=0.210、和P=0.736)。RQ-MSP检测对照组和CML患者甲基化水平发现,DOK2在CML患者中甲基化水平显著高于对照组(P<0.001),而DOK1和DOK5甲基化在CML患者与对照组无显著差异(P=0.659和P=0.624)。临床相关性分析发现,DOK2高、低甲基化患者在性别、年龄、白细胞计数、血红蛋白、血小板计数、和染色体核型这些临床参数间均无显著统计学差异(P>0.05)。此外,在CML患者疾病慢性期、加速期、和急变期的临床分期中,DOK2高、低甲基化组之间也无显著统计学差异(P>0.05)。经地西他滨去甲基化处理白血病细胞株K562后发现,DOK2表达水平上调,同时甲基化水平和密度均显著下降。MDS患者中DOK1/2/5甲基化检测显示,DOK1和DOK2甲基化水平在MDS患者中显著高于对照组(P=0.017和P<0.001),而DOK5甲基化在MDS患者中与对照组无显著差异(P=0.073)。临床相关性分析发现,DOK1和DOK2高、低甲基化在MDS患者的性别、年龄、白细胞计数、血红蛋白、血小板计数、和骨髓原始细胞比例之间均无显著统计学差异(P>0.05)。此外,DOK1和DOK2高、低甲基化与核型分组、IPSS评分、和基因突变这些临床参数也无明显相关性(P>0.05)。生存分析发现,DOK1和DOK2高甲基化MDS患者总体生存时间较低甲基化患者相对缩短,但差异无统计学意义(P=0.974和P=0.305)。结论DOK1和DOK2基因在AML患者中表达水平下调,且是不良预后的独立危险因素。DOK5在AML中虽然表达水平较对照组低,但与AML患者的预后无关。DOK1和DOK2基因高甲基化在AML中是常见分子事件且与不良预后相关,且DOK1和DOK2基因表达及甲基化在AML中呈负相关。MDS患者中也检测到DOK1和DOK2基因高甲基化是常见分子事件,但不影响患者预后。在CML患者中未检测到DOK1/2/5基因表达水平的异常,甲基化检测发现DOK2在CML中呈高甲基化状态,但与疾病进展无关。