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目的：用体外实验的研究方法，观察硫酸铍（BeSO4）致人胚肺成纤维细胞（MRC-5）中三磷酸肌醇受体Ⅲ型（IP3RⅢ）DNA甲基化的变化、DNA甲基化相关基因DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、MBD2、MeCP2的表达水平、IP3RⅢ的表达水平及细胞内钙离子浓度的改变，探讨硫酸铍是否通过DNA甲基化机制影响细胞的损伤。用DNA甲基化转移酶抑制剂5-氮杂胞苷（AZC）对人胚肺成纤维细胞进行干预，进一步验证硫酸铍致人胚肺成纤维细胞的损伤是否通过DNA甲基化机制造成，同时用适量的去乙酰化酶抑制剂（TSA）干预细胞，观察在DNA甲基化过程中是否存在组蛋白乙酰化协同作用。方法：将体外培养人胚肺成纤维细胞，分为4组，空白组、BeSO4组（低中高BeSO4组，浓度分别为1、10、100μmol/L）、干预组（DNA甲基化转移酶抑制剂与硫酸铍组、乙酰化抑制剂与硫酸铍组，浓度分别为10μmol/LAZC+10μmol/LBeSO4、0.5μmol/LTSA+10μmol/LBeSO4）、阳性对照组（DNA甲基化转移酶抑制剂组、去乙酰化酶抑制剂组，浓度分别为AZC10μmol/L、TSA0.5μmol/L）。细胞生长至对数生长期，根据实验需求，达到细胞密度后，加入药物培养24h后收集细胞，分别进行以下实验：1.巢式降落式甲基化特异性PCR（nM-PCR）法检测IP3RⅢDNA甲基化改变；2.qPCR测定DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、MBD2、MeCP2mRNA的表达；3.免疫组化（SP）法检测IP3RⅢ的表达4.激光共聚焦法检测细胞内[Ca2+]的水平；5. PCR法检测AZC对IP3RⅢDNA甲基化及TSA对组蛋白乙酰化干预作用，qPCR法检测AZC对DNA甲基化相关基因的干预作用，同时利用相同的方法观察TSA的协同作用。结果（1）DNA甲基化实验结果显示：BeSO4中、高剂量组IP3RⅢDNA甲基化程度与对照组相比，差异有统计学意义（P﹤0.01），且随着药物浓度的增加IP3RⅢ DNA甲基化程度降低。（2）qPCR结果显示：BeSO4中、高剂量组DNMT1、DNMT3bmRNA表达与对照组相比显著降低（P﹤0.01）；BeSO4低、中、高剂量组DNMT3a、MBD2和MeCP2mRNA表达与对照组相比均降低（P﹤0.05或P﹤0.01）。（3）免疫组化实验结果显示：BeSO4中、高剂量组IP3RⅢ表达与对照组比较，IP3RⅢ表达量升高（P﹤0.05或P﹤0.01）。（4）激光共聚焦实验结果显示：BeSO+4高剂量组细胞内[Ca2]浓度高于对照组，差异具有统计学意义（P﹤0.01）。（5）AZC对DNA甲基化干预作用实验结果表明：AZC阳性对照组、AZC干预组，IP3RⅢDNA甲基化程度与对照组相比，差异均具有统计学意义（P﹤0.01）；AZC干预组较BeSO4中剂量组、AZC阳性对照组相比IP3RⅢDNA甲基化的程度明显降低。AZC阳性对照组、AZC干预组中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、MBD2和MeCP2mRNA表达与对照组相比，差异均具有统计学意义（P﹤0.01）且AZC干预组较BeSO4中剂量组、AZC组中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、MBD2和MeCP2mRNA表达量降低。（6）TSA对乙酰化干预作用实验研究：TSA阳性对照组、TSA干预组中IP3RⅢ乙酰化程度与对照组相比，差异均具有统计学意义（P﹤0.01）；TSA干预组较BeSO4中剂量组、TSA阳性对照组，IP3RⅢ乙酰化程度降低。TSA对照组、TSA干预组中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、MBD2和MeCP2mRNA表达与对照组相比，差异均具有统计学意义（P﹤0.01）且TSA干预组较BeSO4中剂量组、TSA阳性对照组DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、MBD2和MeCP2mRNA相对量降低。结论（1）BeSO4可引起MRC-5细胞中IP3RⅢDNA甲基化。（2）BeSO4可能通过IP3RⅢDNA甲基化机制引起MRC-5细胞的损伤。（3）BeSO4可引起MRC-5细胞内钙离子浓度增高。（4）通过甲基化抑制剂进一步验证了BeSO4引起MRC-5细胞的损伤过程中DNA甲基化起到了关键作用。（5）组蛋白乙酰化在DNA甲基化过程中起协同作用。