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防御素（Defensin）是一类广泛分布于动物和植物界，富含精氨酸和半胱氨酸残基的阳离子内源性抗微生物肽，具有广泛的生物学活性，可抗细菌、囊膜病毒等多种病原微生物，并且具有不诱导细菌产生耐药性的特性。此外，防御素还具有免疫调节功能。因此，防御素被认为是一种新型抗生素，作为抗感染制剂具有广阔的应用前景。本论文首先构建了猪β-防御素-1（Porcineβ-defensin-1, PBD-1）原核表达质粒，表达了重组PBD-1，然后通过体内外试验检测了重组PBD-1的抗微生物活性，旨在为进一步研发新型治疗制剂奠定基础。应用RT-PCR获得了长为247bp的PBD-1全基因序列，首先构建了重组克隆载体pGM-T-PBD-1，进而构建了表达PBD-1成熟肽的重组表达载体PET-32a-PBD-1。然后在大肠杆菌BL21细胞中成功表达了24.5kDa的重组PBD-1。利用6×His标签蛋白纯化试剂盒纯化重组PBD-1，获得了纯化的重组PBD-1。体外试验证明重组PBD-1对大肠杆菌、沙门氏菌、链球菌、葡萄球菌和巴氏杆菌均具有不同程度的抗菌活性，随着重组PBD-1浓度的升高，抗菌活性随之增强。重组PBD-1在体外分别与猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）和禽流感病毒（Avian influenza virus，AIV）（H9N2）作用1h后，可以抑制病毒在相应细胞上增殖，阻止细胞病变的出现；当PEDV和AIV分别感染细胞1h后，重组PBD-1对PEDV的致细胞病变效应抑制效果不明显，但可抑制AIV的致细胞病变效应。对人工感染大肠杆菌病雏鸡的治疗试验表明，重组PBD-1可明显降低雏鸡发病率、死亡率及肉眼病理变化程度，其治疗效果与头孢曲松钠的治疗效果无显著差异；当重组PBD-1与头孢曲松钠联合应用时的疗效更佳。感染后1周重组PBD-1治疗组与联合治疗组的平均体重显著高于非治疗感染组的体重（P＜0.05），而头孢曲松钠治疗组与感染非治疗组的平均体重差异不显著（P＞0.05）。综合上述研究结果表明，本研究表达的重组PBD-1，具有广泛的抗微生物活性，但针对不同的细菌或病毒抑制效果存在差异。重组PBD-1对大肠杆菌实验感染病鸡有明显的治疗效果，当其与抗生素联合应用时疗效更佳。