【摘 要】
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通过基因组规模的遗传学筛选，我们鉴定出了120个对钙离子敏感的酿酒酵母基因缺失株。这些基因的功能与细胞代谢、蛋白质分选、离子稳态、转录、细胞内运输、细胞周期和高渗胁迫应答等方面相关。其中7个基因编码ESCRT-I，-II，和-III蛋白复合物的成分，这些复合物的功能是形成能够分选蛋白质到液泡或溶酶体的多泡复合体（MVB）。在胞外钙离子胁迫条件下，这些ESCRT缺失株的细胞质内钙离子浓度升高，并激活
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通过基因组规模的遗传学筛选，我们鉴定出了120个对钙离子敏感的酿酒酵母基因缺失株。这些基因的功能与细胞代谢、蛋白质分选、离子稳态、转录、细胞内运输、细胞周期和高渗胁迫应答等方面相关。其中7个基因编码ESCRT-I，-II，和-III蛋白复合物的成分，这些复合物的功能是形成能够分选蛋白质到液泡或溶酶体的多泡复合体（MVB）。在胞外钙离子胁迫条件下，这些ESCRT缺失株的细胞质内钙离子浓度升高，并激活钙调磷酸酯酶，但是编码内质网/高尔基体膜上的钙泵基因PMR1的表达量却降低了。之前的研究表明，在这些ESCRT缺失株中，Rim101蛋白不能被正常剪切。我们的研究证明，这些缺失株的钙离子敏感性至少部分是由于Nrg1表达量的升高从而抑制了PMR1的表达引起的，并且这些菌株对钙离子的敏感性可以被组成型激活型Rim101（C端缺失型）的表达所抑制。7个ESCRT缺失株背景下PMC1的敲除能够增加ESCRT缺失株对钙离子的敏感性，而PMR1的敲除则无明显的影响。Nrg1在体外和体内均可以与PMR1启动子上的两个结合位点结合。另外，我们鉴定出PMR1启动子上有两个Crz1-依赖性应答元件，这两个元件是钙离子诱导表达所必须的。在碱性应答条件下，PMR1的表达水平在Crz1和Nrg1的共同作用下维持在一定的水平，Crz1或Nrg1的缺失都能打破这个平衡。
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