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FGFR1OP定位于染色体6q27,编码的是一类富含亮氨酸的亲水蛋白质。FGFR1OP蛋白最初是在引起干细胞骨髓增生病的癌蛋白中作为FGFR1的融合伴侣被发现,融合基因(FGFR1OP—FGFR1)产生的嵌合蛋白包含N—末端富含亮氨酸的区域和FGFR1的催化区的融合,可以促进造血干细胞的增殖和白血病等恶性肿瘤的形成。PTEN作为一种抑癌基因,于1997年被发现,该基因编码双重特异性磷酸脂酶,在多种恶性肿瘤中发生突变或缺失,导致其抑癌功能减弱或丧失,引起肿瘤的发生、侵袭和转移。本研究采用免疫组织化学方法对非小细胞肺癌(NSCLC)组织中FGFR1OP和PTEN的表达水平进行了检测,探讨二者与NSCLC发生、发展和预后的相关性。
材料与方法:
一、材料
肺癌组织的石蜡标本来源于2000-03~2002—12在中国医科大学盛京医院外科手术切除的58例NSCLC患者。男35例,女23例。年龄34~76岁,中位年龄59岁。根据1999年WTO肺癌国际组织分类标准,病理诊断为腺癌32例,高分化、中分化、低分化分别为10、13和9例;鳞状细胞癌26例,其中高分化、中分化、低分化分别为9、7和10例。
二、主要试剂
抗FGFR1OP兔多克隆抗体购自ProteinTech Group,Inc. Chicago,USA,PTEN(KP—39);鼠单克隆抗体购自Santa CruzBiotechnology,Inc.CA,USA,SP试剂盒等购于福州迈新生物技术开发公司。
三、方法:免疫组织化学染色
全部组织样本均经4%甲醛溶液固定,石蜡包埋,制成4μm厚的切片,采用链霉菌抗生物素过氧化酶(SP)免疫组化法,按SP试剂盒提供的说明书操作。以PBS代替一抗作为空白对照,显微镜下观察。
四、结果判定
染色结果由2名有相关经验的病理科医生进行判定,以细胞质和(或)细胞核出现棕黄色颗粒为阳性细胞,随机选取5个视野(×400),以阳性细胞占肿瘤细胞百分比>10%为阳性表达,并利用图像分析系统(图像分析仪采用MetaMorph/Evolution Mp5.0/B×51,US/JP,UIC/Olympus显微图像分析系统)对FGFR1OP和PTEN蛋白表达进行分析,用光密度值(OD)表示(OD=Integrated Optical Densing/Number of Pixels=整合的光密度/构成对象的像素数)。
五、统计学分析
应用SPSS11.3软件进行F检验、t检验,检验水准α=0.05。
结果:
一、FGFR1OP的表达和临床病理因素的相关性:
FGFR1OP在肺癌中呈棕褐色胞核和胞质染色,阳性表达率为91.4%(53/58),与患者的年龄和性别无关;与病理类型,分化程度及临床分期密切相关。鳞癌(OD值0.1426±0.0176)中的表达高于腺癌(OD值0.1357±0.0094),两者差异有统计学意义,P=0.002。肿瘤的分化程度较低(低分化、中分化、高分化时,腺癌P=0.003,鳞癌P=0.001),且临床分期越晚(Ⅲ、Ⅳ期对比Ⅰ、Ⅱ期,P=0.009),FGFR1OP的OD值越高。
二、PTEN的表达和临床病理因素的相关性:
PTEN蛋白在肺癌中呈棕褐色胞质染色,阳性表达率为44.8%(26/58)。PTEN在肺腺癌中的表达(OD值0.1615±0.0036)高于其在肺鳞状细胞癌中的表达(OD值0.1578±0.0042),差异有统计学意义,P=0.031。肿瘤分化程度较低(低分化、中分化、高分化时,腺癌P=0.023,鳞癌P=0.015),且临床分期越晚时(Ⅲ、Ⅳ期对比Ⅰ、Ⅱ期,P=0.0008),PTEN均为低表达或表达缺失。
结论:
在肺腺癌中,FGFR1OP与PTEN的表达呈负相关,相关系数r=-0.733,P=0.025,在肺鳞癌中未发现两者有明显的相关性。