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目的:1了解盆底功能障碍性疾病(pelvic floor dysfunion,PDF)阴道壁成纤维细胞受力前、受力后Ⅰ型胶原(colⅠ)、Ⅲ型胶原(colⅢ)、转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)基因的表达水平。2从细胞外基质的变化探讨力学因素在PFD发病中的作用。3从细胞力学水平探讨盆底功能障碍性疾病的发病机制。方法:1研究对象:选自2009年10月—2010年7月河北医科大学第二医院妇科因PFD住院手术患者的阴道壁组织,共12例,所有患者均按照美国盆底器官脱垂定量分期法( pelvic organ prolapse quantitation,POP-Q)评分,每位患者均完成尿动力实验,其中POP患者中至少一个部位符合POP-Q分类法的Ⅲ-Ⅳ度(子宫脱垂合并阴道前壁脱垂3例,合并阴道后壁脱垂5例,单纯前后壁脱垂4例),所有患者中合并压力性尿失禁者3例,单纯脱垂而无压力性尿失禁者9例。平均年龄为58.3±9.6岁,平均产次2.9±1.2次。所有患者均排除呼吸系统、心血管系统及皮肤系统疾病等结缔组织异常性疾病。采取标本均得到患者的同意,并签署知情同意书。2所取标本经体外培养后,对其进行鉴定,确定为阴道壁成纤维细胞后,送至生物力学实验室,将阴道壁成纤维细胞于FX-4000TM细胞柔性基底拉伸系统加载(0.3HZ、12%、正弦波)。以加载力后4小时、15小时、24小时的阴道壁成纤维细胞为实验组;以静态培养的阴道壁成纤维细胞为对照组。3采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对对照组、受力后4小时、15小时、24小时Ⅰ型胶原(colⅠ)、Ⅲ型胶原(colⅢ)、转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)基因的表达水平进行检测,所得数据用SPSS13.0分析,以P<0.05为有统计学意义。结果:1所培养组织于培养接种后9-10天开始有细胞自组织块边缘游离出来。呈梭形,边界清楚,祛除组织块后约30天成纤维细胞融合,呈条索状及漩涡状。免疫细胞化学抗波形蛋白染色阳性表达率91.6%,结合取材部位,证实为阴道壁成纤维细胞。2阴道壁成纤维细胞在FX-4000TM细胞柔性基底拉伸系统加载(0.3HZ、12%、正弦波)下,随着受力时间(4小时、15小时、24小时)的延长,细胞的形态特征及排列方式均发生了变化。成纤维细胞随加载力时间的延长而变得排列有序。3对照组colⅠm RNA的表达水平为1.178±0.071,受力后4、15、24小时表达分别为1.092±0.038、1.198±0.031、1.120±0.098,四者比较,差异有统计学意义(P=0.035);对照组colⅢm RNA的表达水平为0.673±0.029,受力后4、15、24小时表达分别为0.313±0.019、0.504±0.033、0.853±0.210,四者相比,差异有统计学意义(P=0.015);对照组TGF-β1 m RNA的表达水平为0.852±0.039,受力后4、15、24小时表达分别为0.673±0.052、0.897±0.051、0.895±0.015,四者相比,差异有统计学意义(P=0.0001);对照组MMP-1m RNA的表达水平为1.167±0.036,受力后4、15、24小时表达分别为0.669±0.109、1.085±0.176、1.325±0.048,四者相比,差异有统计学意义。(P=0.017)。结论:1 PFD阴道壁成纤维细胞原代培养成功。2 PFD患者,其阴道壁成纤维细胞在受力的情况下,colⅠ、colⅢ、TGF-β1、MMP-1随着受力时间的变化发生了相应的变化,这些细胞外基质的变化,有可能在盆底功能障碍性疾病的发生中起重要作用。