背景:急性重症胆管炎(ACST)是胆道感染中最严重的一种疾病,具有发病急、病情重、变化快、并发症多、死亡率高等特点。而由此引起的脓毒症及进一步发展出现的多器官功能不全综合征(MODS)是导致患者死亡的直接原因。因此,细菌和内毒素(LPS)诱发的细胞因子和炎症介质过度释放引起的脓毒症成为该病病理生理变化的关键,也是当前研究的热点。在 ACST 导致的 MODS 中,肝损伤被认为是一种较突出的表现,具有重要临床意义。 目的:本实验旨在研究 ACST 大鼠模型制备及减压内引流的理想方法;观察ACST 大鼠白细胞(WBC)、血小板(PLT)、血清谷丙转氨酶(ALT)、胆红素(BIL)、LPS、肿瘤坏死因子 α(TNF-α)及一氧化氮(NO)的变化规律;探讨 LPS、TNF-α、NO 及核转录因子 κB(NF-κB)在 ACST 发病中的意义及对肝损伤的影响;观察ACST 时肝脏病理变化、caspase-3 表达强度及肝细胞凋亡率,探讨肝损伤的机制及形式;探讨中西医相结合方法对 ACST 大鼠的治疗作用及可能机制,为临床治疗提供实验理论依据。 方法:104 只健康 SD 大鼠,雌雄各半,随机分为 8 组:(1)假手术(SO)组:仅游离胆总管;(2)ACST 组:制备 ACST 模型;(3)单纯减压(SD)组:造模后 6h 行胆道减压引流术;(4)单纯中药(SH)组:造模前 4h 开始灌胃给清胆汤,日 2 次;(5)单纯抗生素(SA)组:造模前 0.5h 开始给抗生素,日 2 次;(6)减压+中药(DH)组:造模并联合应用减压引流术和清胆汤;(7)减压+抗生素(DA)组:造模并联合应用减压引流术和抗生素;(8)减压+中药+抗生素(DHA)组:造模并联合应用减压引流术和清胆汤及抗生素。造模后 48 小时取标本并计算各组大鼠死亡率;全自动血液分析仪检测血常规;鲎试剂偶氮基质显色法检测血清 LPS2浓度;放射免疫法检测血清 TNF-α 浓度;硝酸还原酶法检测血清 NO 浓度;全自动生化分析仪检测血清 ALT 和 D-bil、I-bil 水平;光镜下观察肝脏病理变化;免疫组化法检测肝细胞 NF-κB 和 caspase-3 表达情况;TUNEL 法检测肝细胞凋亡。结果:1. SO 组无大鼠死亡,ACST 组死亡率最高(50%),其次为 SH 组(43.8%),两者无显著差异(P>0.05)。SD、SA、DH、DA 及 DHA 组死亡率较 ACST 组显著下降(P<0.01),其中 DHA 组最低(8.3%)。2. ACST、SH 和 SA 组大鼠 WBC 显著高于 SO 组(分别为 P<0.01,P<0.01,P<0.05),三组间无显著差异;SD、DH、DA 及 DHA 等减压治疗组 WBC 显著低于 ACST 组(P<0.05),与 SO 组比较无统计学差异。3. 所有胆道感染组大鼠的 PLT 均明显低于 SO 组(P<0.01);减压治疗组 PLT均高于相应非减压治疗组(P<0.05);抗生素治疗组 PLT 高于相应中药治疗组(P<0.05)。4. ACST、SD、SH 和 SA 组大鼠血清 ALT 均显著高于 SO 组(P<0.01);除SH 组外其它组 ALT 均低于 ACST 组(P<0.05);减压组 ALT 显著低于相应非减压组(P<0.01);在减压基础上应用中药和抗生素,血清 ALT 无显著差异;不进行减压治疗时,中药组 ALT 显著高于抗生素治疗组(P<0.01)。5. 减压组 D-BIL 和 I-BIL 均显著低于其它非减压组(P<0.01);在非减压组中D-BIL 均显著高于相应的 I-BIL(P<0.01);与 ACST 组相比,SH 组 D-BIL 和 I-BIL反而升高(P<0.05)。6. 与 SO 组相比,ACST 组大鼠血清 LPS 明显升高(P<0.01);SD、SA 和DA 组 LPS 亦高于 SO 组(P<0.05);与 ACST 组相比,各治疗组血清 LPS 均显著下降(P<0.01);LPS 在减压组较相应非减压组下降更为明显,中药治疗组较抗生素组下降明显(P<0.05)。7. 与 SO 组相比,ACST、SA 组大鼠血清 TNF-α 显著升高(分别为 P<0.01,P<0.05),二者无显著差异;与 ACST 组相比除 SA 组外,其它组 TNF-α 均显著下降(P<0.05);TNF-α 在减压组低于相应非减压组(P<0.05),中药治疗组与相应抗生素组间无统计学差异。8. 胆道感染的各组大鼠血清 NO 均显著高于 SO 组(P<0.01),其中 ACST 组最高;除 SH 组外其它治疗组 NO 均低于 ACST 组(P<0.01);NO 在减压组低于相