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骆驼血清中存在着一种天然缺失轻链的重链抗体,克隆其可变区获得目前所知的最小抗原结合片段称为纳米抗体。纳米抗体与传统的抗体相比,具有分子量小、稳定性好,易于表达等独特的性质。在抗体药物的开发、医学检测、蛋白亲和纯化等方面具有广阔的发展前景。谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合标签是目前应用最为广泛的融合标签之一。该标签蛋白不仅被应用于蛋白质的亲和纯化,还被应用于融合蛋白的检测以及蛋白质之间的相互作用的检测。鉴于GST标签蛋白的重要功能以及纳米抗体所具有的特性,我们希望能够获得具有自主知识产权的GST蛋白特异性的纳米抗体。本研究采用原核系统表达并纯化抗原GST蛋白,免疫健康双峰驼,以其外周血为材料建立纳米抗体初级免疫文库。然后利用噬菌体展示技术筛选富集抗原特异性的纳米抗体,并通过ELISA获得与GST蛋白特异性结合的阳性单克隆。最后利用GST pull-down技术来验证我们得到的纳米抗体与抗原GST之间是否能够相互结合,以扩展其后期的应用。通过以上技术,我们成功构建了GST特异性的纳米抗体文库,并最终筛选获得该蛋白特异性的纳米抗体。此外,基于实验室的另外一个研究方向,我们还进行了基因多态性与癌症易感性的关联研究。食管癌是世界常见的恶性肿瘤之一,我国食管癌的发病类型主要以食管鳞状细胞癌(Esophageal Squamous Cell Carcinoma,ESCC)为主。microRNA(mi RNA)是一种非编码RNA,可在转录后水平调控基因的表达,与癌症的发生、发展密切相关。位于miRNA上的SNP位点可以通过改变其表达量或结构来影响肿瘤的发生与发展。本研究通过数据库选定两个位于miRNA前体成熟区域的SNP位点miRNA-146a rs2910164(C/G)和miRNA-196a rs11614913(C/U)为研究对象,通过病例-对照的研究方法来检测这两个MirSNPs与ESCC易感性的关系。研究结果表明:在我们所研究的1400例ESCC病例和2185例正常对照人群中,rs11614913 T>C位点与ESCC的发病风险具有显著相关性:与野生基因型TT相比,CC基因型能够显著增加ESCC的风险(OR=1.11,95%CI:1.01-1.22,P=0.049);在纯合子模型和隐性模型下进行分层分析显示,在非饮酒组中,CC基因型都能够显著增加ESCC的风险(纯合模型下:OR=1.14,95%CI:1.00-1.30,P=0.046,隐性模型下OR=1.13,95%CI:1.01-1.27,P=0.029)。但是对于已被证明与多种癌症相关的miRNA-146a rs2910164(C/G)位点,在我们的研究中未发现该位点与ESCC之间存在显著的相关性。