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恶性肿瘤现已成为人类死亡的主要原因之一,每年全世界大约有700 万人死于癌症。肝癌在我国发病率很高,全球每年31.5 万肝癌患者中,我国有13.8 万,占43.7%,死亡率居各种肿瘤死亡率的第二位,已成为威胁我国人民生命健康的主要杀手之一。现有的肝癌治疗方法临床疗效并不理想,研究开发抗肝癌药物是我国面临的重要抗癌任务。近年来抗肿瘤药物的研究方向已由单一的细胞毒类药物向多元化方向发展。中药作为我国的传统药物,其对肿瘤的治疗作用也越来越受到重视。目前,越来越多的证据表明细胞增殖、分化、凋亡三者之间的平衡失调与肿瘤的发生、发展有关,利用药物诱导肿瘤细胞凋亡很有希望成为治疗肿瘤的一条可能的途径,将为包括肝癌在内的肿瘤的治疗提供一个新的思路。氧化苦参碱属于苦参型生物碱,是中药苦参的主要提取物,具有抗心律失常、抗肿瘤、保肝和调节免疫的作用。有研究表明,氧化苦参碱对肿瘤坏死因子诱导的人体肝细胞和大鼠肝细胞的凋亡有抑制作用,同时对二乙基亚硝胺诱导的鼠肝癌有明显的预防和阻断作用。也有报道指出,氧化苦参碱在抑制体外培养的人肝癌和卵巢癌细胞增殖方面有一定的作用,提示氧化苦参碱对肝癌可能具有一定的抗肿瘤作用,其抗肿瘤机制可能同诱导肝癌细胞凋亡有关。但目前关于氧化苦参碱诱导人体癌细胞凋亡机制的研究还非常少。本文以肝癌细胞株(SMMC-7721)为研究对象,利用生物化学和分子生物学的方法,主要研究氧化苦参碱对肝癌细胞增殖、凋亡相关基因表达以及端粒酶活性的影响,探讨氧化苦参碱诱导肝癌细胞凋亡的作用机理。本文的主要研究方法、内容及结果如下: ①用MTT 法分别测定氧化苦参碱(OMT)对SMMC-7721 细胞和人正常肝细胞HL-7702 的生长抑制情况。结果显示,OMT 对体外培养的SMMC-7721 细胞的生长有明显的抑制作用,同时对HL-7702 细胞的生长也有一定的抑制作用,且均具有时间、浓度依赖性。但OMT 对SMMC-7721 细胞增殖的抑制作用要强于对HL-7702 增殖的影响。②用流式细胞仪结合PI 和AnnexinⅤ染料分析OMT 对SMMC-7721 细胞周期的影响及诱导凋亡的情况。OMT 能使SMMC-7721 细胞周期阻滞于G2/M 期和S期,使细胞不能正常进入G0/G1期,从而诱导SMMC-7721 细胞凋亡,在1.0mg/ml的浓度下作用48h 后细胞凋亡率达到了61.12%。③用流式细胞仪结合荧光(FITC)标记抗体,量化分析OMT 对实验细胞癌相关基因bcl-2 和p53 蛋白表达的影响。结果表明,OMT 能下调bcl-2 基因的表达,同