目的:研究在甲状腺乳头状癌（PTC）中核糖体S6蛋白激酶4（RSK4）基因对Podocalyxin类蛋白（PODXL）表达的影响及作用机制,并探究PODXL基因在PTC中的作用及影响。方法:收集2019年7月至2021年7月期间,收治于青岛大学附属医院甲状腺外科因患有PTC而入院治疗的200例患者标本,标本采集于进行甲状腺全切以及次全切除术患者的PTC组织和邻近的正常组织,分别通过Western blot、RT-PCR实验方法检测PTC组织及其邻近正常组织中PODXL、RSK4在蛋白和转录水平的表达量差异,与此同时采用免疫组织化学染色方法对PODXL进行定位分析,并进行PODXL与RSK4表达水平之间的相关性分析。通过Western blot方法检测在RNA干扰RSK4表达后的PTC细胞及其对照细胞中分别加入泛素蛋白酶体抑制剂和溶酶体抑制剂后PODXL蛋白降解变化情况。利用Western blot方法分别测定RNA干扰PODXL表达和RSK4表达后对PTC细胞MAPK/ERK通路活性变化的影响。分别使用PODXL sh RNA慢病毒载体和PODXL过表达质粒对PTC细胞进行转染,并进行Western blot验证转染效率;敲减和过表达PODXL后PTC细胞增殖能力的改变通过CCK-8实验进行检测;采用Transwell细胞迁移及侵袭实验对敲减和过表达PODXL的PTC细胞迁移和侵袭能力的改变进行检测。应用SPSS 26.0对实验相关数据做统计学分析,并使用Graphpad Prism 8进行绘图。结果:1.RT-PCR结果表明在PTC组织与邻近正常组织中PODXL m RNA的相对表达量无显著差异;Western blot实验结果表明,PTC组织中PODXL蛋白表达水平显著高于邻近正常组织;免疫组化实验结果显示,高表达PODXL的阳性细胞数在PTC组织明显高于邻近正常组织,且在PTC组织中RSK4表达和PODXL表达之间存在负相关关系。2.通过Western blot实验方法探究RSK4调控PODXL的机制,结果显示RSK4是通过溶酶体途径影响PODXL蛋白的降解。3.通过Western blot蛋白水平验证相关信号通路,结果表明:PODXL的下调可使MAPK-ERK信号通路活性降低,RSK4是通过调节PODXL抑制MAPK-ERK通路的活性。4.检测PODXL对肿瘤的生物学活性的影响:CCK-8细胞增殖实验结果表明,敲减或过表达PODXL组与相应的对照组之间PTC细胞增殖能力没有显著的统计学差异,PODXL基因对PTC细胞增殖能力无显著影响;通过Transwell侵袭及迁移实验,结果表明过表达PODXL的BCPAP细胞侵袭迁移能力显著高于其相应对照组,而敲减PODXL组细胞侵袭迁移能力显著低于对照组。结论:1.PTC组织中PODXL蛋白表达显著高于其邻近正常组织,且PODXL表达与RSK4表达呈负相关关系。2.RSK4介导PODXL通过溶酶体途径降解。3.RSK4通过调控PODXL抑制MAPK/ERK通路的活性。4.PODXL作为一种促癌基因,可能通过促进MAPK/ERK通路的激活,促进PTC细胞的相关恶性生物学行为。