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喘息是婴幼儿时期的常见症状。流行病学调查表明50%小儿有一次以上的喘息发作,说明小儿喘息的普遍存在。喘息是由于气道壁水肿、平滑肌收缩以及粘液栓所致小气道狭窄的最终结果。中国儿童支气管哮喘诊断与防治指南(2008年修订)中按照喘息的原因和转归的将5岁以下儿童喘息分为三种临床表型即(1)早期一过性喘息,(2)早期起病的持续性喘息(指3岁前起病),(3)迟发性喘息即哮喘。因此从5岁以下喘息儿童中把可能发展为持续性哮喘的患儿识别出来进行有效早期干预是非常必要的。目的本临床研究试图通过检测反复喘息患儿的鼻咽分泌物(Nasopharyngeal secretions, NPS)和外周血中的白介素-17(Interleukin-17, IL-17)、嗜酸细胞阳离子蛋白(Eosinophil Cationic Protein, ECP)及嗜酸性粒细胞(Eosinophil, EOS)计数,比较它们之间的相关性。以探寻一些无创和有效的检测指标来区分5岁以下反复喘息儿童的临床表型,以便对其正确诊断、有效干预和治疗。材料和方法该实验分为喘息组和对照组。喘息组研究对象均来自均来自2008年9月-2009年4月本院呼吸科门诊就诊和住院治疗的患儿,反复喘息以喘息次数≥2次/半年或≥3次/1年为标准；根据患儿自身有医生诊断的过敏性疾病(包括湿疹、变应性皮炎、过敏性鼻炎、食物过敏)或父母一方有哮喘病史者为特应质高危因素的标准,将喘息组分为为喘息Ⅰ组(有高危因素之一者)和喘息Ⅱ组(无高危因素者)。并从本院外科同期住院治疗的疝气、肾结石等非感染性疾病术前患儿中随机抽取20例做为对照组。所有入组儿童均为足月出生,排除先天性疾病、异物吸入引起的喘息和免疫性疾病史,两周内无全身和局部激素应用史；年龄均在4个月至5岁,各组年龄、性别差异均无统计学意义(P＞0.05)喘息和对照组儿童分别于入院后第1天清晨空腹或就诊时采集外周静脉血3ml,37℃水浴1小时后,3000r/min离心15分钟,分离血清,置-70℃冰箱保存。无菌吸痰管从患儿的单个鼻孔进入5～6cm达鼻咽部,通过负压吸引取得鼻咽分泌物1mL,处理离心后收集上清液冻存于-70℃冰箱,用于检测IL-17和ECP。细胞沉渣涂片,瑞氏染色后,在油镜高倍镜下计数300个除上皮细胞以外的有核细胞,计算EOS、中性粒细胞(Polymorphonucleaneutrophil leukocytes, PMN)占有核细胞(鳞状上皮细胞除外)的百分数(标本涂片鳞状上皮细胞<20%为合格鼻咽分泌物)。采用免疫吸附实验(ELISA)法检测血清和鼻咽分泌物中的IL-17水平。血清、鼻咽分泌物中的ECP水平由UniCAP全自动分析检测仪检测。所有试验数据以均数±标准差(x±s)表示,采用SPSS 13.0统计软件进行统计分析,组间比较用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验。相关性分析用Pearson直线相关分析,P<0.05表示差异有显著性。结果1喘息组血清和鼻咽分泌物IL-17水平明显高于对照组(P<0.01),其中喘息Ⅰ组IL-17水平高于喘息Ⅱ组,差异有统计学意义(P＜0.05)。2喘息Ⅰ组血清和鼻咽分泌物中ECP水平明显高于喘息Ⅱ和对照组(P＜0.05),而喘息Ⅱ组和对照组之间差异无统计学意义(P＞0.05)。3喘息Ⅰ组NPS和外周血中嗜酸性粒细胞(EOS)计数明显高于喘息Ⅱ组和对照组,差异有统计学意义(P＜0.05、P＜0.01),而喘息Ⅱ组NPS和外周血中EOS计数和对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)；喘息Ⅰ组和喘息Ⅱ组NPS中性粒细胞(PMN)计数明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01)4相关性分析(1)喘息Ⅰ组血清和NPS中IL-17水平和EOS呈正相关(r值分别为0.93、0.62,P＜0.05),喘息Ⅰ、Ⅱ组NPS中IL-17水平与PMN呈正相关(r值分别为0.56、0.66,P<0.05),与其他细胞无相关性。喘息Ⅰ组血清和NPS中ECP水平和EOS呈正相关(r值分别为0.786、0.89,P＜0.05)。(2)血清和NPS中ECP呈明显相关(r值为0.813,P＜0.01)；NPS和血清中IL-17正相关(r值为0.313,P＜0.05)。结论1 IL-17、ECP和EOS在具有特应质高危因素喘息患儿的喘息发作中起着关键作用,气道炎症以EOS为主；无特应质高危因素的患儿喘息发作与病毒感染相关,气道炎症以PMN为主。2鼻咽分泌物中的ECP、IL-17分别与血清中的ECP、IL-17明显相关,提示鼻咽分泌物能够反应气道炎症。