【摘 要】
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本文研究了具有抗菌作用的枯草芽孢杆菌V1J菌株产生抗菌物质的条件和抗菌物质的活性。结果表明,BPY培养基为V1J的最适种子培养基,该种子培养基产生的菌量高,菌体健壮,最适菌龄为2
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本文研究了具有抗菌作用的枯草芽孢杆菌V1J菌株产生抗菌物质的条件和抗菌物质的活性。结果表明,BPY培养基为V1J的最适种子培养基,该种子培养基产生的菌量高,菌体健壮,最适菌龄为20h。SDAY培养基为产抗菌物质活性最高的培养基,36h开始产生抗菌物质,84h抗菌物质活性达到最大值。改良基础培养基由于成分简单,且活性较高而用于发酵条件的优化研究。V1J菌株产生抗菌物质的最适发酵条件为:30℃,100ml/250ml的装液量,发酵初始PH6.5,接种量为13%,0.1~0.3%的NaCl含量。Al3+,Zn2+,Mg2+,Mn2+对抗菌物质的活性有一定的促进作用。Ag+,Hg2+,Fe2+,Cu2+对抗菌物质的产生和菌的生长起抑制作用;pb2+在低于0.05mmol/L的浓度下对于抗菌活性有一定促进作用。低浓度的表面活性剂Tween80对V1J发酵有促进作用。
抗菌谱的研究表明,V1J产生的抗菌物质具有广谱抗菌活性,对多种丝状真菌,酵母具有拮抗作用,对于部分革兰氏阳性菌和阴性菌也有抑制作用。
对抗菌物质的研究表明,该抗菌物质对酸碱比较稳定,最适作用pH值为6-8。在65℃以下抗菌物质比较稳定,而在85℃时抗菌物质活性全失。胃蛋白酶,胰蛋白酶,溶菌酶,果胶酶,纤维素酶处理对抗菌物质的活性影响不大。草酸,EDTA,Tween80和氯仿对抗菌物质略有影响,而甲醇,乙醇,三氯乙酸,苯酚,二甲苯,丙酮,脲,十二烷基磺酸钠和TritonX-100对抗菌物质几乎没有影响。紫外光对抗菌物质有一定影响,可见光对抗菌物质几乎没有影响。抗菌物质的最适作用pH为7.0。
最佳萃取有机溶剂的筛选:表明萃取效果最好的有机溶剂是正丁醇。利用酸化的处理方法获得粗提物,通过梯度实验确定其最适酸化PH为3.5。有机溶剂对粗提物的选择性溶解效果最好的是乙腈,而80%的甲醇溶解选择性较好。醇提物旋转蒸发,制得黄色粉末,经检测发现lmg/ml的醇提物水溶液中蛋白质含量约4.9508ug/ml,抑菌圈检测发现其含量与抑菌圈大小呈正相关。
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