法国、荷兰、俄罗斯三国进境马铃薯有害生物风险分析及RT-PCR病毒检测技术研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mengqingwang
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
马铃薯是仅次于水稻、小麦、玉米的世界第四大粮食作物。我国是马铃薯生产的大国,种植面积与产量均居世界第一,但我国的马铃薯产业基本还处于一种自发的无序状态,与国外种薯质量差异巨大,各种马铃薯病害发生情况严重。因此从马铃薯生产强国引种高品质马铃薯成为提升我国马铃薯产业的重要途径和手段。依据FAO和IPPC的相关规定,通过引种前的有害生物风险分析,可以科学有效的降低引种带来的各种风险和危害,保护本国农业生产、生态安全。目前在马铃薯上已发现的病毒、类病毒多达30余种,病毒病的发生和传播严重制约了马铃薯的生产。建立快速、准确、灵敏的病毒检测方法可以最大程度的确保引种马铃薯的种薯质量,控制马铃薯病毒病的传播。本研究通过有害生物风险分析对从法国、荷兰、俄罗斯引种马铃薯种薯进行了合理的风险预测,并确立了科学有效的风险管理措施,降低了引种风险;同时建立了马铃薯病毒的单重、双重、多重反转录聚合酶链式反应检测体系。根据FAO制定的《有害生物风险分析准则》,从传播途径开始进行有害生物风险分析,初步提出了法国、荷兰、俄罗斯三国进境马铃薯种薯上的有害生物种类和数量,其分别为179种、152种、142种。根据有害生物的地理分布、官方控制、经济重要性、种薯传带的可能性等综合指标进行初步评估,筛选出进境马铃薯种薯潜在的限定有害生物(PRP)和非限定有害生物(NRP)。对进境马铃薯种薯潜在的PRP,根据有害生物传入、定殖、扩散的可能性以及潜在的影响等进行详细的风险评估,确定了各国进境马铃薯上潜在的检疫性有害生物(QP)和限定的非检疫性有害生物(RNQP)。分析确定法国QP共14种、RNQP共23种;荷兰QP共26种、RNQP共26种;俄罗斯QP共21种、RNQP共17种。依据风险分析结果,选取3种有较高引种风险的马铃薯病毒——马铃薯M病毒(PVM)、番茄斑萎病毒(TSWV)、马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)进行RT-PCR检测。利用试剂盒法、RNAiso Plus试剂法提取马铃薯病毒RNA,结果表明两者提取的RNA纯度高且完整性较好,满足RT-PCR检测的要求。根据NCBI报道的病毒全基因组序的保守区域序列设计了PVM、TSWV、PSTVd特异性引物对,采用单重RT-PCR对3种马铃薯病毒进行了扩增,扩增片断大小分别为630bp(PVM)、747bp(TSWV)、251bp(PSTVd)。回收3种病毒的单重扩增产物并测序,经NCBI BIAST同已报道的病毒序列比对,证明PVM、TSWV、PSTVd的RT-PCR扩增靶带序列完全正确。试验从反转录下游引物量、Mg2+浓度等方面对单重、双重和多重RT-PCR体系检测马铃薯病毒进行了探索和优化。
其他文献
宫颈糜烂是妇女常见的一种慢性宫颈炎,因其白带增多、腰酸及接触性出血,常常给许多妇女造成困扰,也是宫颈癌的高危因素[1].治疗方法有多种,但疗效各异.我们应用妇科光谱治疗
目的探索超声乳化技术在治疗硬核性白内障的效果及评价老年性白内障超声乳化吸出和人工晶体植入术的疗效.方法对年龄45~101岁的老年性白内障9 025例 9 240眼行超声乳化吸出联
目前,治疗恶性肿瘤仍然是困扰人类的一大难题,现代医学尚未找到彻底根治恶性肿瘤的有效方案。放疗、化疗及外科手术成为当前治疗肿瘤的基本手段,但在放疗、化疗中应用的各种抗癌
在辅助生殖技术中,由于诱导排卵药物的广泛使用,以及辅助生殖技术行多个胚胎的移植或单卵双胎的发生,致使多胎妊娠发生率明显升高,直接造成妊娠并发症和围生儿病死率上升,即使得到
脊髓损伤(Spinal cord injury SCI)是一种可逆性差、致残率高的中枢神经系统损伤性疾病,其损伤机制十分复杂,目前仍是一大医学难题。脊髓损伤的基因治疗目前尚处于探索阶段,
学生社区是当前对大学生加强思想品德教育的重要阵地。新形势下,依托学生社区开展高校思想政治教育工作已是时势所趋。学生社区思想政治教育队伍的建设成为当前进一步加强和
工业化的飞速发展,使城市中聚集大量的危险源,引发很多安全事故,不仅严重威胁着人民生命财产的安全,而且由于管理不善引发的安全事故还会严重影响城市经济的安全与发展。在当
目的探讨参芪扶正注射液对晚期肿瘤患者的T淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞的影响及生活质量的影响.方法将晚期肿瘤患者随机分为试验组和对照组,控制用相似的治疗方法,试验组加用
我们回顾性地分析我院2002~2006年尿路感染患者的主要病原菌的分布情况,以了解本地区尿路感染患者主要病原菌的分布趋势,为临床治疗及必要时的经验用药提供依据,报告如下。
近年来,妇科腹腔镜手术不断完善,以对病人创伤小、痛苦小、恢复快、疗效好等优点,被人们普遍接受.腹腔镜手术与开腹手术比较,前者对病人的生理影响和麻醉要求有所不同.我院开